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1、目的:探討補腎化瘀生新方對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性的調(diào)控作用及其延緩細(xì)胞衰老的機制。
方法:40只SPF級SD大鼠隨機分為補腎化瘀生新組和對照組,補腎化瘀生新組為補腎化瘀生新方灌胃,對照組生理鹽水灌胃,連續(xù)灌胃7天,早晚各一次。第7天首次灌胃2h后腹主動脈取血制備含藥血清;100只SD新生乳鼠進行BMSCs的提取、培養(yǎng)及分離純化,用4g/L D-gal誘導(dǎo)建立BMSCs衰老模型。將自然衰老及衰老模型組隨機分為補腎化瘀
2、生新組和對照組,將制備好的含藥血清直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。光鏡觀察每組各代 BMSCs的形態(tài)變化;MTT法檢測各組不同濃度血清BMSCs細(xì)胞活性的變化;比色法檢測自然衰老各組及衰老模型各組β-半乳糖苷酶活性變化。
結(jié)果:光鏡下見正常培養(yǎng)的BMSCs形態(tài)均一,呈長梭形、三角形,并呈漩渦樣生長,衰老模型組 BMSCs多呈扁三角形、橢圓形,且生長緩慢;根據(jù) MTT細(xì)胞增殖結(jié)果可知第1天和第2天時細(xì)胞生長較慢,處于增殖潛伏期,在第3天時開始
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