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文檔簡介
1、目的:構(gòu)建miR-210的慢病毒載體(Lenti-miR-210-Luciferase),然后轉(zhuǎn)染人牙周膜干細(xì)胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSC)后,檢測成血管因子低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在hPDLSCs的表達(dá)。
2、r> 方法:在體外分離培養(yǎng) hPDLSC,構(gòu)建慢病毒載體 Lenti-miR-210-Luciferase(Lenti-LacZ-Luciferase為對照組),檢測慢病毒滴度后,將慢病毒轉(zhuǎn)染hPDLSCs,通過qPCR和細(xì)胞免疫組織化學(xué)法來檢測HIF-1α及VEGF的表達(dá)。
結(jié)果:用Lenti-miR-210-Luciferase轉(zhuǎn)染hPDLSCs,0、1、4、7和14d后 qPCR檢測,結(jié)果表明轉(zhuǎn)染后的第4d,HIF-1
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