靶向抑制人滑膜細(xì)胞IL-1β基因表達(dá)的siRNA的設(shè)定與篩選.pdf

1、目的:創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎(Post-traumatic arthritis，PTA)的發(fā)病原因尚不清楚，大量炎性介質(zhì)的釋放在關(guān)節(jié)損傷中扮演了重要角色，尤以IL-1受到格外關(guān)注。RNA干擾技術(shù)(RNAi)能夠高效阻斷哺乳動物細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)。本研究借助此項(xiàng)技術(shù)，設(shè)計并篩選出能高效抑制IL-1基因表達(dá)的小型干擾RNA(small interferingRNA，siRNA)，經(jīng)慢病毒載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染人滑膜細(xì)胞，從而有效減少滑膜細(xì)胞中IL-1基因的表達(dá)，以

2、探索創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎基因治療切實(shí)可行的方法。
　　方法:設(shè)計合成3對不同的并且能抑制IL-1基因表達(dá)的siRNA，采用RT-PCR方法檢測細(xì)胞上清液中IL-1表達(dá)水平，并采用ELISA方法檢測細(xì)胞上清液IL-1表達(dá)水平。
　　結(jié)果:對照組相比，3對siRNA中均可有效減少人滑膜細(xì)胞中IL-1表達(dá)增加(P＜0.01)，同時細(xì)胞上清液中IL-1分泌量下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。
　　討論:成功設(shè)計合成了靶向抑制IL