急性髓系白血病Kindlins和血管生成素表達研究.pdf

1、血管生成素(Angiopoietins,Angs)是一組分泌型的細胞因子,主要表達在血管內(nèi)皮細胞表面,其中Ang-1、Ang-2在血管生成中起主要作用。是獨立于血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)之外另一種新的促內(nèi)皮細胞生長因子,作用于內(nèi)皮細胞特異性受體酪氨酸激酶(Tie-2)發(fā)揮作用。該族細胞因子及其受體在胚胎血管發(fā)育、血管重塑、創(chuàng)傷修復(fù)、腫瘤血管形成等方面起著重要作用。國外學(xué)者研究表明血管生成素及其受體在白血病患者細胞及細胞系中有異常表達,

2、與VEGF相互協(xié)調(diào),通過自分泌和旁分泌模式參與白血病的發(fā)病過程。
　　 Kindlins是最近發(fā)現(xiàn)的粘著斑蛋白,它參與整合素活化、細胞遷移、增殖和分化的調(diào)控。目前已鑒定出Kindlins家族含有3個成員-Kindlin-1、Kindlin-2、Kindlin-3。人體內(nèi)Kindlins異?？梢詫?dǎo)致多種遺傳性疾病,例如Kindlin-1功能異常導(dǎo)致Kindler綜合征(Kindler syndrome,KS)和Kindlin-3功

3、能異常導(dǎo)致白細胞粘附缺陷(leukocyte adhesion deficiency,LAD-Ⅲ)。目前已在人類實體腫瘤(乳腺癌、前列腺癌、平滑肌肉瘤)中發(fā)現(xiàn)Kindlin-2與腫瘤的侵襲性及耐藥性有關(guān)。
　　 研究目的:
　　 探討不同白血病細胞系、成人急性髓系白血病Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3的表達情況。
　　 研究方法:
　　 1.在患者知情同意情況下收

4、集中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院白血病診療中心成人初診急性髓系白血病骨髓標本。
　　 2.分離骨髓標本中單個核細胞,提取mRNA,采用RQ-PCR方法檢測病人標本中Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3的表達水平。
　　 3.結(jié)合病人臨床資料,分析Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3與成人急性髓系白血病關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.An

5、g-1,Ang-2,Kindlin-3在K562、KG-1a、HL60、U937、Jurkat細胞系中均有表達,Tie-2僅表達于KG-1a、HL60細胞系中,Kindlin-2表達于K562、KG-1a、HL60中。
　　 2.AML患者Kindlin-2表達水平明顯低于非AML者(P=0.004),而兩組間Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-3表達水平未見統(tǒng)計學(xué)差異。
　　 3.男性患者Ang-2表達

6、水平高于女性(P=0.013),其余4種目的基因表達無類似性別差異。
　　 4.起病時白細胞計數(shù)(WBC)≥130×109/L的患者Ang—1、Kindlin-3表達水平明顯高于WBC<30×109/L組(P<0.001,P=0.049)；而Kindlin-2則相反,在WBC<30×109/L組表達較高(P=0.020)。
　　 5.AML患者治療緩解后Kindlin-2、Kindlin-3表達明顯升高(P<0.001,

7、P<0.001)。
　　 6.國內(nèi)形態(tài)學(xué)診斷分型中M2b、M3組Ang-1、Ang-2、Kindlin-3表達均低于M4、M5組及M1、M2a、M6組(分組兩兩比較Ang1:P<0.001,P<0.001；Ang2:P=0.010,P=0.003；Kindlin-3:P=0.027,P=0.043)；Kindlin-2則相反,在M2b、M3組中表達較高(P=0.007,P=0.032)。M4、M5組與M1、M2a、M6組五種基因

8、表達水平未見明顯差異。3組間Tie-2未見明顯差異。
　　 7.Ang-1在CD56、CD15、CD19陽性組的水平均低于陰性組(P<0.001,p=0.05,P=0.025),在CD117、CD7陽性組的水平均高于陰性組(P=0.012,P<0.001)。Ang-2在CD7陽性組的水平高于陰性組(P=0.029),CD14陽性組的水平則低于陰性組(P=0.010)。Kindlin-2在MPO陽性組的水平高于陰性組(P=0.01

9、2)。
　　 8.79例患者進行了治療療效評價,61例獲得CR,18例未獲得CR。Ang-1低表達組CR率較高,且具有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.027)。Kindlin-2高表達組有高CR率的趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.050)。五種目的基因在CR和non—CR兩組間的表達水平無統(tǒng)計學(xué)相關(guān)性。
　　 9.Ang-1表達水平與NCCN預(yù)后分組存在相關(guān)性,它在預(yù)后差組、中等組表達均高于在良好組的表達,存在統(tǒng)計學(xué)差異(良好組vs中

10、等組P=0.012；良好組vs不良組P=0.025；中等組vs不良組P=0.757)。其余四種目的基因均與NCCN預(yù)后分組無相關(guān)性。Ang-1,Ang-2在MLL重排陽性組表達水平高于陰性組,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.001,P=.036)；而Kindlin-2在MLL重排陽性組表達水平較低(P=0.014)。
　　 10.Ang-1表達水平隨預(yù)后不良因素積分升高而升高(低分組vs中間組P=0.023；低分組vs高分組P=0.02

11、8:中間組vs高分組P=0.574); Kindlin-2表達水平則隨預(yù)后不良因素積分升高而降低(低分組vs中間組P=0.050:低分組vs高分組P=0.012；中間組vs高分組P=0.278)；Kindlin-3在預(yù)后差組中表達水平較高,但不具有統(tǒng)計學(xué)差異(低分組vs中間組P=0.036；低分組vs高分組P=0.329；中間組vs高分組P=0.623)。
　　 11.Ang-1與Ang-2中等強度正相關(guān)(r=0.496,P<0

12、.001),Ang-1與Kindlin-3為弱正相關(guān)(r=0.322,P=0.002),Ang-2與Tie-2為弱正相關(guān)(r-0.266,P=0.012),Tie-2與Kindlin-2為弱正相關(guān)(r=0.393,P<0.001),Tie-2與Kindlin-3為弱正相關(guān)(r=0.303,P=0.004)。余不相關(guān)。在Ang-1低表達同時伴有Kindlin-2高表達的群體(23名)CR率為100％,明顯高于其它分組(P=0.022)。<