急性髓系白血病Kindlins和血管生成素表達(dá)研究.pdf

1、血管生成素(Angiopoietins,Angs)是一組分泌型的細(xì)胞因子,主要表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面,其中Ang-1、Ang-2在血管生成中起主要作用。是獨(dú)立于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)之外另一種新的促內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子,作用于內(nèi)皮細(xì)胞特異性受體酪氨酸激酶(Tie-2)發(fā)揮作用。該族細(xì)胞因子及其受體在胚胎血管發(fā)育、血管重塑、創(chuàng)傷修復(fù)、腫瘤血管形成等方面起著重要作用。國(guó)外學(xué)者研究表明血管生成素及其受體在白血病患者細(xì)胞及細(xì)胞系中有異常表達(dá),

2、與VEGF相互協(xié)調(diào),通過自分泌和旁分泌模式參與白血病的發(fā)病過程。
　　 Kindlins是最近發(fā)現(xiàn)的粘著斑蛋白,它參與整合素活化、細(xì)胞遷移、增殖和分化的調(diào)控。目前已鑒定出Kindlins家族含有3個(gè)成員-Kindlin-1、Kindlin-2、Kindlin-3。人體內(nèi)Kindlins異?？梢詫?dǎo)致多種遺傳性疾病,例如Kindlin-1功能異常導(dǎo)致Kindler綜合征(Kindler syndrome,KS)和Kindlin-3功

3、能異常導(dǎo)致白細(xì)胞粘附缺陷(leukocyte adhesion deficiency,LAD-Ⅲ)。目前已在人類實(shí)體腫瘤(乳腺癌、前列腺癌、平滑肌肉瘤)中發(fā)現(xiàn)Kindlin-2與腫瘤的侵襲性及耐藥性有關(guān)。
　　 研究目的:
　　 探討不同白血病細(xì)胞系、成人急性髓系白血病Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3的表達(dá)情況。
　　 研究方法:
　　 1.在患者知情同意情況下收

4、集中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院白血病診療中心成人初診急性髓系白血病骨髓標(biāo)本。
　　 2.分離骨髓標(biāo)本中單個(gè)核細(xì)胞,提取mRNA,采用RQ-PCR方法檢測(cè)病人標(biāo)本中Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3的表達(dá)水平。
　　 3.結(jié)合病人臨床資料,分析Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-2、Kindlin-3與成人急性髓系白血病關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.An

5、g-1,Ang-2,Kindlin-3在K562、KG-1a、HL60、U937、Jurkat細(xì)胞系中均有表達(dá),Tie-2僅表達(dá)于KG-1a、HL60細(xì)胞系中,Kindlin-2表達(dá)于K562、KG-1a、HL60中。
　　 2.AML患者Kindlin-2表達(dá)水平明顯低于非AML者(P=0.004),而兩組間Ang-1、Ang-2、Tie-2、Kindlin-3表達(dá)水平未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3.男性患者Ang-2表達(dá)

6、水平高于女性(P=0.013),其余4種目的基因表達(dá)無類似性別差異。
　　 4.起病時(shí)白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)≥130×109/L的患者Ang—1、Kindlin-3表達(dá)水平明顯高于WBC<30×109/L組(P<0.001,P=0.049)；而Kindlin-2則相反,在WBC<30×109/L組表達(dá)較高(P=0.020)。
　　 5.AML患者治療緩解后Kindlin-2、Kindlin-3表達(dá)明顯升高(P<0.001,

7、P<0.001)。
　　 6.國(guó)內(nèi)形態(tài)學(xué)診斷分型中M2b、M3組Ang-1、Ang-2、Kindlin-3表達(dá)均低于M4、M5組及M1、M2a、M6組(分組兩兩比較Ang1:P<0.001,P<0.001；Ang2:P=0.010,P=0.003；Kindlin-3:P=0.027,P=0.043)；Kindlin-2則相反,在M2b、M3組中表達(dá)較高(P=0.007,P=0.032)。M4、M5組與M1、M2a、M6組五種基因

8、表達(dá)水平未見明顯差異。3組間Tie-2未見明顯差異。
　　 7.Ang-1在CD56、CD15、CD19陽(yáng)性組的水平均低于陰性組(P<0.001,p=0.05,P=0.025),在CD117、CD7陽(yáng)性組的水平均高于陰性組(P=0.012,P<0.001)。Ang-2在CD7陽(yáng)性組的水平高于陰性組(P=0.029),CD14陽(yáng)性組的水平則低于陰性組(P=0.010)。Kindlin-2在MPO陽(yáng)性組的水平高于陰性組(P=0.01

9、2)。
　　 8.79例患者進(jìn)行了治療療效評(píng)價(jià),61例獲得CR,18例未獲得CR。Ang-1低表達(dá)組CR率較高,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.027)。Kindlin-2高表達(dá)組有高CR率的趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.050)。五種目的基因在CR和non—CR兩組間的表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。
　　 9.Ang-1表達(dá)水平與NCCN預(yù)后分組存在相關(guān)性,它在預(yù)后差組、中等組表達(dá)均高于在良好組的表達(dá),存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(良好組vs中

10、等組P=0.012；良好組vs不良組P=0.025；中等組vs不良組P=0.757)。其余四種目的基因均與NCCN預(yù)后分組無相關(guān)性。Ang-1,Ang-2在MLL重排陽(yáng)性組表達(dá)水平高于陰性組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001,P=.036)；而Kindlin-2在MLL重排陽(yáng)性組表達(dá)水平較低(P=0.014)。
　　 10.Ang-1表達(dá)水平隨預(yù)后不良因素積分升高而升高(低分組vs中間組P=0.023；低分組vs高分組P=0.02

11、8:中間組vs高分組P=0.574); Kindlin-2表達(dá)水平則隨預(yù)后不良因素積分升高而降低(低分組vs中間組P=0.050:低分組vs高分組P=0.012；中間組vs高分組P=0.278)；Kindlin-3在預(yù)后差組中表達(dá)水平較高,但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(低分組vs中間組P=0.036；低分組vs高分組P=0.329；中間組vs高分組P=0.623)。
　　 11.Ang-1與Ang-2中等強(qiáng)度正相關(guān)(r=0.496,P<0

12、.001),Ang-1與Kindlin-3為弱正相關(guān)(r=0.322,P=0.002),Ang-2與Tie-2為弱正相關(guān)(r-0.266,P=0.012),Tie-2與Kindlin-2為弱正相關(guān)(r=0.393,P<0.001),Tie-2與Kindlin-3為弱正相關(guān)(r=0.303,P=0.004)。余不相關(guān)。在Ang-1低表達(dá)同時(shí)伴有Kindlin-2高表達(dá)的群體(23名)CR率為100％,明顯高于其它分組(P=0.022)。<