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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
在博來霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型中,探討血紅素氧合酶-1(HO-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在肺纖維化中的表達(dá)情況,及苦參堿對(duì)其表達(dá)影響。
方法
90只健康雄性SD大鼠。隨機(jī)分為5組,分別為正常對(duì)照組、模型組、潑尼松處理組、苦參堿低劑量組、苦參堿中劑量組。氣管內(nèi)給予博萊霉素(5 mg.g-1)制作肺纖維化動(dòng)物模型。正常對(duì)照組氣管內(nèi)給予等體積溶媒(生理鹽水)。建模后第1d起,分別根據(jù)組別予以潑尼
2、松(0.56 mg.g-1.d-1)、不同劑量的苦參堿(50mg.g-1.d-1、100mg.g-1.d-1)及溶媒每天灌胃一次。于造模第7、14、28d時(shí),每次各組隨機(jī)處死6只大鼠取肺組織,檢測(cè)肺組織勻漿中丙二醛(malondialdehyde,MDA)濃度、羥脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;RT-PCR法檢測(cè)肺組織HO-1、TNF-αmRNA的表達(dá);Western blot法檢測(cè)肺組織HO-1,ELISA檢測(cè) T
3、NF-α產(chǎn)生情況;肺組織病理切片行HE、Masson染色。
結(jié)果
1、病理切片顯示:模型組7d以炎癥反應(yīng)為主,可見肺成纖維細(xì)胞;14d可見大量炎癥細(xì)胞,許多肺成纖維細(xì)胞,Masson染色見有膠原,肺纖維化開始形成;28d可見大量的肺成纖維細(xì)胞,肺泡部分出現(xiàn)擠壓,Masson染色見有更多膠原沉積,說明肺纖維化模型已形成。各處理組的病理變化與模型組的病理改變相似,但程度均較模型組輕,其中以苦參堿中劑量組與潑尼松處理組減輕
4、明顯。
2、MDA及HYP含量:與空白對(duì)照組比,模型組、潑尼松組、苦參堿低劑量組、苦參堿中劑量組均升高(p<0.05),以模型組最明顯(p<0.01);予以苦參堿及潑尼松干預(yù)以后,二者含量均有下降,以28d時(shí)改變最明顯,與模型組相比,其中苦參堿中劑量組與潑尼松組改變最明顯(p<0.05)。
3、RT-PCR、Western blot及ELISA顯示:在正常肺組織中,HO-1處于低表達(dá)狀態(tài),TNF-α有表達(dá)。肺纖維化時(shí)
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