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文檔簡介
1、[目的]觀察養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1細胞增殖的影響,并探討其具體的作用機制。
[方法]以體外小鼠精原細胞系GC-1細胞培養(yǎng)為模型,用無血清培養(yǎng)液誘導GC-1細胞凋亡,繼而加入養(yǎng)精膠囊提取液(0.01~1 mg/mL)作用后,用MTT法檢測細胞的活性;用流式細胞儀檢測細胞周期;實時熒光定量PCR法和Western blot法檢測OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質的表達;利用GFRa1 siRNA和LY294002探究其作用機制
2、;通過流式細胞儀檢測細胞凋亡;實時熒光定量PCR法和Western blot法檢測caspase-3的表達。
[結果]養(yǎng)精膠囊提取液加入GC-1細胞后,能夠顯著增加細胞的活力;能降低G0/G1期細胞比例,增加S期細胞比例;OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質的表達水平增加;使用GFRa1 siRNA和LY294002處理后,明顯抑制了養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1細胞的增殖,降低了養(yǎng)精膠囊提取液對OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質
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