火麻仁抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶和抗氧化活性的研究.pdf

1、高血壓是以體循環(huán)動(dòng)脈壓增高為主要表現(xiàn)的臨床綜合征，是常見(jiàn)的慢性疾病。臨床使用的合成降壓藥帶來(lái)的副作用已經(jīng)引起人們的重視，因此，亟需尋找和開(kāi)發(fā)更安全、有效的新型降壓藥。中藥具有天然無(wú)毒副作用、安全性高等優(yōu)點(diǎn)，迅速成為人們研究的熱點(diǎn)。開(kāi)發(fā)有降壓作用的中藥并研究其作用機(jī)制和作用成分具有重要意義。
　　臨床和藥理實(shí)驗(yàn)證明火麻仁有降血壓作用，但是其降壓作用機(jī)制和有效成分研究甚少。目前文獻(xiàn)報(bào)道的研究主要是關(guān)于火麻仁蛋白水解物對(duì)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶

2、（ACE）和腎素的抑制活性?；鹇槿屎胸S富的多不飽和脂肪酸（PUFA），而多不飽和脂肪酸也有降低血壓的作用，且與抑制ACE的活性有關(guān)。此外，研究表明活性氧（ROS）與高血壓的產(chǎn)生和發(fā)展有著密切的聯(lián)系。所以本論文對(duì)火麻仁蛋白水解物和多不飽和脂肪酸進(jìn)行ACE抑制活性測(cè)試，并研究火麻仁的體外抗氧化活性，希望從抑制ACE和減少氧化應(yīng)激這兩條途徑來(lái)探討火麻仁降壓作用機(jī)制。
　　采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定了火麻油中脂肪酸的組成和含量。采用尿

3、素包合法對(duì)多不飽和脂肪酸進(jìn)行純化，對(duì)影響尿素包合法分離效果的溶劑與尿素用量、結(jié)晶溫度和結(jié)晶時(shí)間進(jìn)行了單因素實(shí)驗(yàn)考察，在確立的優(yōu)化條件下，多不飽和脂肪酸純度從70.37％提高到90.26%，收率為31.3%。
　　對(duì)純化后的火麻仁多不飽和脂肪酸進(jìn)行ACE抑制活性測(cè)試，并且和游離脂肪酸、油酸、亞油酸、α-亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)品以及火麻仁蛋白水解物的IC50值進(jìn)行比較，結(jié)果表明火麻仁多不飽和脂肪酸和蛋白水解物對(duì)ACE都有抑制活性。火麻油多不飽和脂

4、肪酸對(duì)ACE的IC50值介于亞油酸和油酸之間，表明三種不飽和脂肪酸通過(guò)共同作用來(lái)抑制ACE的活性。通過(guò)Lineweaver-Burk雙倒數(shù)作圖法，確定火麻仁多不飽和脂肪酸對(duì)ACE的抑制作用類型為反競(jìng)爭(zhēng)性抑制，多不飽和脂肪酸主要通過(guò)形成PUFA-ACE-底物復(fù)合物來(lái)使其失活。
　　對(duì)火麻仁依次進(jìn)行分級(jí)萃取，AB-8大孔樹(shù)脂和sephadex LH-20柱分離，采用1,1-二苯基-2-硝基苯肼（DPPH）自由基清除法對(duì)抗氧化活性進(jìn)行評(píng)