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1、目的:探討α7受體激動(dòng)劑DMXB-A及阻滯劑芋螺毒素G對(duì)膽管癌神經(jīng)浸潤(rùn)的調(diào)節(jié)作用,探討其可能的機(jī)制,尋找阻斷膽管癌早期發(fā)生周?chē)窠?jīng)浸潤(rùn)的新方法,為提高膽管癌患者手術(shù)切除率及預(yù)后提供有效的治療途徑。
方法:1.膽管癌細(xì)胞QBC939及RBE細(xì)胞培養(yǎng);2.應(yīng)用Western Blot檢測(cè)以上兩種膽管癌細(xì)胞中α7受體基因表達(dá)情況;3.CHRNα7腺病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染;4.膽管癌體外神經(jīng)浸潤(rùn)模型的建立;5.體外模型培養(yǎng)液的選擇;6.鏡下觀察
2、膽管癌細(xì)胞粘附、浸潤(rùn)神經(jīng)纖維的情況。共培養(yǎng)72小時(shí)后,統(tǒng)計(jì)與神經(jīng)黏附的腫瘤細(xì)胞數(shù),并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
結(jié)果:1、通過(guò)應(yīng)用Western Blot分別檢測(cè)以上兩種膽管癌細(xì)胞中α7受體的基因表達(dá),得出RBE膽管癌細(xì)胞中α7受體基因相對(duì)高表達(dá);
2、α7受體基因成功轉(zhuǎn)染膽管癌RBE細(xì)胞,并使其表達(dá)穩(wěn)定;
3、成功構(gòu)建DRG/神經(jīng)RBE細(xì)胞共培養(yǎng)體系,RBE細(xì)胞可融解穿透基質(zhì),并黏附于背根神經(jīng)所發(fā)出的神經(jīng)纖維
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