神經(jīng)型乙酰膽堿受體α7的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)研究.pdf

1、配體門(mén)控離子通道(LGICs)是一類(lèi)離子型受體或通道受體。它們是一類(lèi)由化學(xué)信使(如內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì))打開(kāi)或關(guān)閉的跨膜離子通道。配體門(mén)控的離子通道與嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的神經(jīng)系統(tǒng)疾病密切關(guān)聯(lián),可作為神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物的作用靶點(diǎn)。但是,關(guān)于配體門(mén)控離子通道的結(jié)構(gòu)與功能知識(shí)的缺陷一直是阻礙神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療發(fā)展的關(guān)鍵障礙。
　　 我們以一種與神經(jīng)系統(tǒng)重大疾病相關(guān)的藥物作用靶點(diǎn)——神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型為研究切入點(diǎn),重點(diǎn)關(guān)注和解

2、決神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型結(jié)構(gòu)這一關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題,綜合采用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、結(jié)構(gòu)生物學(xué)等學(xué)科的方法和手段,解析其的三維晶體結(jié)構(gòu)及其與配體結(jié)合的復(fù)合物結(jié)構(gòu),試圖通過(guò)三維結(jié)構(gòu)的解析,闡明其配體結(jié)合及門(mén)控機(jī)制等基本生物學(xué)過(guò)程,為藥物研發(fā)提供結(jié)構(gòu)和理論基礎(chǔ)。
　　 我們已利用由實(shí)驗(yàn)室團(tuán)隊(duì)所發(fā)展的獨(dú)特、高效的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),篩選得到了能夠進(jìn)行體外異源高表達(dá)的神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型的物種cDNA,

3、表達(dá)量達(dá)到了毫克級(jí)別。同時(shí),利用該物種cDNA,通過(guò)大規(guī)模表達(dá)純化,得到了高純度,高產(chǎn)量的神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7全長(zhǎng)的體外五聚體形式蛋白,最終實(shí)現(xiàn)了該蛋白在表達(dá)純化上的突破,為其結(jié)構(gòu)解析奠定了基礎(chǔ)。同時(shí),我們也初步利用常規(guī)坐滴法以及最新發(fā)展的Biclle-Lipid方法嘗試篩選了神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型的晶體生長(zhǎng)條件,這些研究都對(duì)神經(jīng)型乙酰膽堿受體(nAChR)α7亞型三維結(jié)構(gòu)的成功解析有很大幫助。我們也拿