中藥常用成分對(duì)藥物代謝酶CYP1A2活性的影響.pdf

1、中藥經(jīng)常作為西藥的輔助治療手段，與西藥聯(lián)合使用。中藥可能通過(guò)影響藥物代謝酶的活性機(jī)制，增加或降低合用藥物的療效或毒副作用，從而影響人體健康，導(dǎo)致藥物相互作用的發(fā)生。目前關(guān)于中藥及單體成分對(duì)人體藥物代謝酶活性的影響報(bào)道不多。同時(shí)不同研究報(bào)道中，由于采用不同酶的濃度、探針?biāo)幬?、孵化條件等，沒(méi)有統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)方法和手段，使得不同報(bào)道的數(shù)據(jù)沒(méi)有可比性。這就需要有一個(gè)系統(tǒng)的研究，探討中藥對(duì)藥物代謝酶活性的影響。
　　 人細(xì)胞色素P450酶CY

2、P1A2（Cytochrome P4501A2，CYP1A2）約占人肝微粒體中CYP酶總量的13％，是重要的藥物代謝酶之一。參與了大約5％臨床藥物的代謝，有相當(dāng)數(shù)量的藥物不良反應(yīng)與之相關(guān)。熟知的例子包括：因?yàn)榉肊chinacea抑制了人體中CYP1A2的活性，造成咖啡因的體內(nèi)清除率下降；以及圣.約翰草中成分對(duì)CYP1A2抑制而與眾多臨床藥物間發(fā)生的相互作用。因此，了解中藥對(duì)CYP1A2活性的影響，對(duì)于避免藥物相互作用，指導(dǎo)臨床合理用藥

3、具有重要意義。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用人重組肝微粒體酶rCYP1A2與待測(cè)中藥成分及探針?biāo)幬锓悄俏鞫◇w外共孵育系統(tǒng)，通過(guò)測(cè)定探針?biāo)幬锎x產(chǎn)物生成速率的變化表征中藥成分對(duì)rCYP1A2活性影響的方法。共檢測(cè)了226種常見(jiàn)中藥成分（其中197種為2005年版中國(guó)藥典一部規(guī)定的指標(biāo)成分）對(duì)rCYP1A2活性的影響。結(jié)果顯示13種中藥成分（血竭素，補(bǔ)骨脂素，漢黃芩素，丹參酮ⅡA，白楊素，大黃酚，荷葉堿，高良姜素，木犀草素，乙氧基白屈菜紅堿，和

4、厚樸酚，青蒿素，蛇床子素）對(duì)rCYP1A2活性有抑制作用，其IC50值范圍為0.096到5.31μM。為進(jìn)一步驗(yàn)證篩選出的中藥成分在體內(nèi)對(duì)CYP1A2的作用，分別測(cè)定了白楊素、荷葉堿對(duì)大鼠體內(nèi)CYP1A2活性的影響。結(jié)果顯示，大鼠灌胃給予20㎎/㎏荷葉堿后，探針?biāo)幬锓悄俏鞫〉乃幋x參數(shù)與空白組比較，有明顯的改變。而灌胃給予30㎎/㎏白楊素后，實(shí)驗(yàn)組與空白組的探針?biāo)幬锏乃幋鷮W(xué)參數(shù)沒(méi)有明顯變化。由于體外孵育篩選實(shí)驗(yàn)，不但實(shí)驗(yàn)成本高、試驗(yàn)周期

5、長(zhǎng)，而且篩選盲目性大、成功率低，不能滿足對(duì)中藥數(shù)據(jù)庫(kù)的快速、準(zhǔn)確篩選的要求。本實(shí)驗(yàn)以已知的對(duì)CYP1A2有抑制作用的化合物分子為模板，構(gòu)建三維藥效團(tuán)模型。利用前期226種中藥成分的篩選結(jié)果對(duì)藥效團(tuán)模型進(jìn)行測(cè)試，從而對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證和優(yōu)化。最后，采用優(yōu)化后的藥效團(tuán)模型聯(lián)合分子對(duì)接技術(shù)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室自有天然產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫(kù)中約1000個(gè)中藥成分進(jìn)行虛擬篩選，得到候選化合物18個(gè)，并收集得到這18個(gè)候選化合物進(jìn)行藥理活性實(shí)驗(yàn)，其中有5個(gè)化合物對(duì)CYP1A