miRNA在吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中及胰腺癌患者血漿中表達(dá)的初步研究.pdf

1、胰腺癌的起病隱匿、死亡率高、預(yù)后差，其中位生存期僅為6個(gè)月。造成胰腺癌預(yù)后差的主要原因包括胰腺癌的早期診斷率低、化療耐藥率高等。胰腺癌缺少大規(guī)模篩查方法，早期診斷率低，大部分患者在出現(xiàn)癥狀就診時(shí)，已失去最佳手術(shù)機(jī)會(huì)。對(duì)于無法手術(shù)的患者，化療是其首選治療方案。其中，又以吉西他濱為其一線化療藥物在臨床上廣泛使用。但是，胰腺癌患者易對(duì)吉西他濱產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致藥物的敏感性下降，因而嚴(yán)重影響了化療的療效。尋找簡(jiǎn)單方便的胰腺癌篩查方法，提高早期胰腺

2、癌的診斷率，并且降低或逆轉(zhuǎn)胰腺癌對(duì)吉西他濱化療的耐藥性，是目前亟待解決的問題。
　　microRNA(miRNA)是一類非編碼的單鏈RNA，其長(zhǎng)度在19-24個(gè)核苷酸之間，其不僅存在于組織細(xì)胞中，也廣泛存在于外周循環(huán)血中。miRNA可以通過與靶mRNA的尾端非編碼區(qū)相結(jié)合，抑制mRNA的翻譯或者對(duì)靶mRNA進(jìn)行降解，以此調(diào)節(jié)功能性蛋白的表達(dá)水平，進(jìn)而參與人體的多種生理以及病理過程。既往研究表明，miRNA在多種腫瘤組織及血漿中中呈

3、現(xiàn)出表達(dá)量的異常改變，提示其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及對(duì)化療藥物的耐藥性存在一定的相關(guān)性。通過研究miRNA在胰腺癌患者、以及對(duì)吉西他濱耐藥的胰腺癌患者體內(nèi)特異性的表達(dá)譜，可以為提高胰腺癌的早期診斷率、增加胰腺癌對(duì)吉西他濱的敏感性、進(jìn)而提高胰腺癌的生存期提供新的思路。
　　第一部分胰腺癌吉西他濱耐藥患者特異性循環(huán)miRNA的篩選
　　目的：檢測(cè)對(duì)吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中表達(dá)呈現(xiàn)明顯異常的microRNA，為尋找新的生物標(biāo)志

4、物用于胰腺癌的用藥指導(dǎo)和吉西他濱的療效預(yù)測(cè)提供新的思路。
　　方法：收集對(duì)吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿，抽提血漿RNA，采用qPCR方法檢測(cè)并篩選出對(duì)吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中相比于對(duì)吉西他濱不耐藥的胰腺癌患者表達(dá)差異明顯的microRNA。
　　結(jié)果：對(duì)吉西他濱耐藥的胰腺癌患者相較于不耐藥患者存在表達(dá)差異的microRNA有24個(gè)，其中6個(gè)下調(diào)（miR-3145-5p，miR-214、miR-4328、miR-7、mi

5、R-3907及miR-639），18個(gè)上調(diào)（miR-323-3p，miR-450a、miR-301b、miR-655、miR-340#、miR-369-5p、miR-656、miR-224、miR-544、miR-32、miR-433、miR-361-3p、miR-199b-5p、miR-548a-3p、miR-551b、miR-154及miR-3182）。
　　結(jié)論：胰腺癌患者中對(duì)吉西他濱耐藥和不耐藥者血漿microRNA存在較

6、顯著差異，其有可能作為一種潛在的分子標(biāo)志物預(yù)測(cè)吉西他濱在胰腺癌化療過程中的療效。
　　第二部分胰腺癌患者特異性循環(huán)miRNA的篩選
　　目的：檢測(cè)胰腺癌患者血漿中表達(dá)差異的microRNA，為尋求新的分子標(biāo)志物用于胰腺癌的無創(chuàng)性診斷提供理論依據(jù)。
　　方法：收集胰腺癌患者血漿，抽提血漿RNA，采用qPCR方法檢測(cè)并篩選出胰腺癌患者血漿中相比于正常人表達(dá)呈現(xiàn)明顯差異的microRNA。
　　結(jié)果：胰腺癌患者相較于健

7、康人存在表達(dá)差異的microRNA共28個(gè)，其中25個(gè)下調(diào)（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，m m m結(jié)果：胰腺癌患者相較于健康人存在表達(dá)差異的microRNA共28個(gè)，其中25個(gè)下調(diào)（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，iR-3187，miR-3907，miR-3619，m

8、iR-4274，miR-4328，miR-3145-5p，miR-497，iR-214，miR-4728-3p，miR-718，miR-4785，miR-4669，miR-636，miR-4687-5p，iR-638，miR-639，miR-941，miR-874），3個(gè)上調(diào)（miR-32，miR-3182和miR-625#）。
　　結(jié)論：胰腺癌患者血漿中microRNA表達(dá)與正常人群有較顯著的差異，其有可能成為幫助胰腺癌早期診斷