環(huán)孢素A對L6細胞肌原纖維蛋白分解信號通路的影響.pdf

1、骨骼肌是一高度可塑性器官，對運動和飲食等因素可產(chǎn)生適應(yīng)性改變。研究表明運動訓(xùn)練可導(dǎo)致肌肉肥大、骨骼肌纖維類型的轉(zhuǎn)化等。鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶被認為是參與運動誘導(dǎo)的骨骼肌適應(yīng)的重要信號通路。已有的一些研究表明鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶不僅參與了運動誘導(dǎo)的肌纖維轉(zhuǎn)換，而且還可能參與了肌纖維肥大。另一方面，骨骼肌大小不僅與蛋白合成有關(guān)，而且也與蛋白分解有關(guān)。FoxO1/MAFbx/MuRF1是調(diào)節(jié)骨骼肌蛋白分解的重要信號通路。進一步探討鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶信號通路與

2、FoxO通路之間的關(guān)系無疑對了解骨骼肌的適應(yīng)機制具有一定意義。
　　目的：本研究通過對大鼠骨骼肌L6細胞用環(huán)孢素A抑制其鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的活性，觀察環(huán)孢素A對FoxO1/MAFbx/MuRF1信號通路的影響，探討鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶是否影響骨骼肌萎縮信號傳導(dǎo)通路。
　　研究方法：L6細胞分化8天后，隨機分為四組：對照組，咖啡因組，環(huán)孢素A組，咖啡因加環(huán)孢素A組。刺激5小時后，分別提取各組蛋白質(zhì)和核酸，進一步純化后用于Western

3、blotting檢測胞漿胞核FoxO1蛋白含量和熒光定量PCR實驗檢測FoxO1、MAFbx、MuRF1各基因表達。
　　研究結(jié)果：1.熒光定量PCR實驗結(jié)果顯示：與對照組比較，咖啡因組的各基因表達均上調(diào)，其中FoxO1上調(diào)了2.19倍，MAFbx上調(diào)了3.23倍，MuRF1上調(diào)了2.99倍（P?0.05）；環(huán)孢素A組各基因表達與對照組均無明顯差異；環(huán)孢素A加咖啡因組的各基因表達均上調(diào)，其中FoxO1上調(diào)了2.22倍，MAFbx上

4、調(diào)了3.14倍，MuRF1上調(diào)了3.08倍（P?0.05）。
　　2. Western blotting實驗結(jié)果顯示：咖啡因組，環(huán)孢素A組，環(huán)孢素A加咖啡因各組胞漿和胞核 FoxO1蛋白表達明顯高于對照組；環(huán)孢素A組和環(huán)孢素A加咖啡因組胞漿FoxO1蛋白表達還明顯高于咖啡因組；環(huán)孢素A加咖啡因組胞核FoxO1蛋白表達還明顯高于咖啡因組和環(huán)孢素A組。
　　結(jié)論：1.咖啡因上調(diào)FoxO1/MAFbx/MuRF1各基因的表達并增加