紅景天有效成分抗缺血性心臟疾病的作用及機制研究.pdf

1、研究目的:心血管疾病已成為全球首位死因,且流行趨勢不斷加劇。其中缺血性心臟疾病,尤其是心肌梗死,是由于冠狀動脈的狹窄或閉塞,造成心肌氧的供需不平衡,從而導致心肌損傷。本研究探討傳統(tǒng)中藥紅景天中的有效成分對急性缺血心肌細胞的保護作用,并探索其可能機制。
　　研究方法:1、80只Wistar大鼠被隨機分成4組,分別為假手術(shù)組(Shamgroup),陰性對照組(Vehiclegroup),給藥組(Braintone-treatedgro

2、up500mg/kg/day),陽性對照組(Losartan-treatedgroup)。每日灌胃給藥一次。給藥一個月后,通過永久性結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支(LDA)造成急性心肌梗死(AMI)大鼠模型。此后持續(xù)給藥2周。最后,所有存活大鼠實施麻醉后處死。記錄心功能參數(shù),統(tǒng)計梗死面積和死亡率。心臟被采集用于形態(tài)學檢測、毛細血管密度研究和分子水平分析,包括凋亡調(diào)控基因Bcl-2家族和Caspase家族,以及VEGF和eNOS的mRNA表達情

3、況。并檢測肝抗氧化酶活性。2、分離2-3天的新生Sprague-Dawley大鼠心肌細胞,紅景天苷預給藥12h后,細胞接受氧糖剝離(OGD)處理8h。首先分析細胞生存率和形態(tài)改變評價藥效,然后檢測細胞凋亡情況、細胞中活性氧(ROS)含量、凋亡相關(guān)基因表達、線粒體膜電位,探討可能機制。研究結(jié)果:1、給藥組(Braintone)相較于陰性對照組(Vehicle)降低了大鼠AMI后的死亡率(22.2％vs41.5％),顯著減小了心梗面積(18

4、.0％±3％vs30.4％±9％,P＜0.05)。此外,Braintone組心梗兩周后能保持過氧化氫酶活性,顯著高于Vehicle組(13.1±0.48Uvs9.71±0.44U,P＜0.01)。此外,Braintone能明顯提高抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl的表達(分別為1.43倍和2.30倍,P＜0.01),并能顯著下調(diào)促凋亡基因Bax(0.84倍,P＜O.01)的表達,同時抑制Caspase-9和Caspase-3的凋亡信號傳

5、導。給藥組的心臟缺血區(qū)毛細管密度均顯著高于Vehicle組(46.0±13.3vs27.4±12.6,P＜O.01),與Braintone組上調(diào)VEGF和eNOS的mRNA表達相互印證。2、結(jié)果顯示,紅景天苷預處理劑量依賴地提高了OGD后心肌細胞的存活率,同時相差顯微鏡和電鏡結(jié)果顯示紅景天苷減輕了OGD導致的細胞形態(tài)改變。此外,在紅景天苷預處理的心肌細胞中有更少的凋亡,最少的ROS蓄積,上調(diào)的。Bc1-2/Bax比值。并且紅景天苷還能維

6、持正常的線粒體膜電位。
　　結(jié)論:本實驗證明Braintone對缺血心肌具有保護作用。主要機制為通過清除氧自由基,拮抗其介導的氧化反應,抑制心肌細胞凋亡。同時通過上調(diào)缺血區(qū)VEGFmRNA和蛋白的表達,促進缺血區(qū)毛細血管新生,改善微循環(huán)。從而保護缺血心肌組織,減小梗死面積,降低死亡率。其中,紅景天的有效成分紅景天苷通過清除自由基,抑制凋亡和保護線粒體功能,保護心肌細胞,對抗OGD引起的細胞死亡。為紅景天苷成為臨床預防缺血性心臟疾病