水產(chǎn)品中副溶血性弧菌快速檢測技術(shù)及風(fēng)險評估研究.pdf

1、副溶血性弧菌是我國一種重要的食源性病原菌，可引起急性胃腸炎，少數(shù)情況還能引發(fā)敗血病，危及生命。目前，副溶血性弧菌已成為我國一個嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引發(fā)的疾病居微生物性食源性疾病暴發(fā)之首，且發(fā)病人數(shù)呈顯著上升趨勢。特別在沿海地區(qū)，發(fā)病起數(shù)和涉及人數(shù)較我國其它地區(qū)更為嚴(yán)重，必須建立可靠的快速檢測方法，持續(xù)地進(jìn)行水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的主動監(jiān)測和污染控制。 本文以副溶血菌具有種特異性的tlh基因為靶基因，建立聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

2、(PCR)方法檢測水產(chǎn)品中的副溶血性弧菌。經(jīng)過特異性實驗證明本方法具有很好的特異性。用。PCR法對四種水產(chǎn)品中副溶血性弧菌進(jìn)行檢測，同國標(biāo)方法檢測結(jié)果完全一致，表明此法適合于快速檢測水產(chǎn)品中副溶血性弧菌。對于水產(chǎn)品樣品，副溶血性弧菌含量為1CFU/mL的樣品勻漿液增菌5h后，就可以達(dá)到最低檢出要求。此法大大縮短了副溶血性弧菌的檢測時間(7h-8h)，提高了檢測效率，可以滿足快速檢測水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的需要，為行業(yè)提供科學(xué)可靠的技術(shù)支持

3、。 青島作為沿海城市，由于水產(chǎn)品的消費(fèi)量較大且某些居民有生食海鮮的習(xí)慣，副溶血性弧菌成為主要的食源性致病菌，因此有必要了解青島地區(qū)零售水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的污染情況，以作出應(yīng)對措施確保消費(fèi)者安全。運(yùn)用快速檢測方法(PCR法)和MPN法，調(diào)查分析了2005年12月至2006年12月期間青島地區(qū)零售環(huán)節(jié)副溶血性弧菌的污染情況，比較了在不同月份和不同采樣地點，同種水產(chǎn)品中副溶血性弧菌含量變化；并比較了不同種類水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的污染

4、水平，同時分析了青島地區(qū)水產(chǎn)品中副溶血性弧菌污染情況同我國其他沿海地區(qū)的污染情況。結(jié)果表明，青島零售水產(chǎn)品受副溶血性弧菌污染嚴(yán)重。水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的含量會隨采樣地點、時間有所不同，青島地區(qū)相較我國其他沿海地區(qū)而言，零售水產(chǎn)品中副溶血性弧菌污染狀況更為嚴(yán)重。有必要加強(qiáng)對水產(chǎn)品的檢驗監(jiān)督力度，并進(jìn)行水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的風(fēng)險評估，根據(jù)評估結(jié)果提出合理的風(fēng)險管理措施。 利用風(fēng)險評估軟件Risk Ranger，進(jìn)行青島零售水產(chǎn)品中副

5、溶血性弧菌的半定量風(fēng)險評估，預(yù)測消費(fèi)者因食用被致病性副溶血性弧菌污染的水產(chǎn)品所面臨的風(fēng)險。半定量風(fēng)險評估結(jié)果為：青島地區(qū)食用水產(chǎn)品攝入副溶血性弧菌引發(fā)疾病的風(fēng)險級別為52，青島地區(qū)每個消費(fèi)者每天的發(fā)病幾率為4.61×10<'-6>，青島地區(qū)每年預(yù)測總發(fā)病人口數(shù)為9.23×10<'2>，即每年青島地區(qū)由副溶血性弧菌引發(fā)胃腸炎的人數(shù)為923人，推測這個數(shù)與實際數(shù)據(jù)較為接近。基于評估內(nèi)容和結(jié)果，提出風(fēng)險的管理措施，以保證消費(fèi)者的安全：(1)運(yùn)

6、輸、零售環(huán)節(jié)要有良好的存放條件；(2)建議家庭自己制作時要充分的烹調(diào)，在不影響風(fēng)味的同時盡可能延長煮沸時間，充分地殺掉水產(chǎn)品體內(nèi)的致病菌；(3)加強(qiáng)零售水產(chǎn)品的監(jiān)管力度；(4)完善我國食源性疾病監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)；(5)盡快制定水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的限量標(biāo)準(zhǔn)，完善我國食品中微生物標(biāo)準(zhǔn)體系。青島地區(qū)零售水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的半定量風(fēng)險評估，這在我國尚屬首次，為以后開展全面、科學(xué)的風(fēng)險評估提供良好的技術(shù)支持。 通過半定量風(fēng)險評估，可以得到青島

7、地區(qū)消費(fèi)者的風(fēng)險級別，相對于定量風(fēng)險評估的成本更低、耗時短。但如果需要更精確的預(yù)測數(shù)據(jù)，應(yīng)用數(shù)學(xué)模型模擬實際情況，進(jìn)行定量風(fēng)險評估。本文初步探討了用定量的方法評估消費(fèi)者生食水產(chǎn)品所面臨的風(fēng)險。定量風(fēng)險評估包括危害識別、危害描述、暴露評估和風(fēng)險描述四部分內(nèi)容。參考世界衛(wèi)生組織(WHO)和美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)公布的評估報告，利用Beta-Poisson模型模擬劑量反應(yīng)關(guān)系，通過暴露評估預(yù)測青島市居民每人每天生食水產(chǎn)品而攝入的副溶

8、血性弧菌數(shù)為2350個，致病性副溶血性弧菌攝入量為2個-3個。定量評估結(jié)果顯示，水產(chǎn)品單次食用引起食源性副溶血性弧菌胃腸炎的發(fā)生概率為1.04×10<'-6>。并通過數(shù)學(xué)模型模擬了四種控制措施的實際效果，結(jié)果表明通過這四種措施，可以有效地降低食用水產(chǎn)品而引發(fā)副溶血性弧菌胃腸炎的風(fēng)險。本部分研究，通過數(shù)學(xué)模型預(yù)測了生食水產(chǎn)品引起副溶血性弧菌性胃腸炎的風(fēng)險，為我國進(jìn)行微生物危害定量風(fēng)險評估的研究以及建立水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的限量標(biāo)準(zhǔn)打下良好