黃芪注射液對(duì)急性期川崎病外周血單個(gè)核細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)干預(yù)的研究.pdf

1、目的：探討黃芪注射液對(duì)小兒急性期川崎病(KD)外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κ B)活化的影響和對(duì)炎癥細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)的效用。 方法：采用Ficoll密度梯度離心法常規(guī)分離各受試對(duì)象的外周靜脈血，獲得PBMC，將其分編為五組：①空白組(自然培養(yǎng))，②PMA培養(yǎng)組(只加入終濃度為20nmol/L的NF-κ B激動(dòng)劑PMA)，③PMA(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度25mg/ml)培養(yǎng)組，④PMA

2、(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度50mg/ml)培養(yǎng)組，⑤PMA(終濃度20nmol/L)+黃芪注射液(終濃度100mg/ml)培養(yǎng)組，在37℃、5％CO2及相對(duì)濕度為95％的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。免疫細(xì)胞化學(xué)方法觀察培養(yǎng)后各組PBMC內(nèi)NF-κ B的活化水平；酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)雙抗體夾心法測(cè)定培養(yǎng)后上清液中TNF-α的表達(dá)含量。 結(jié)果： (1)在自然培養(yǎng)下，正常對(duì)照(Normal)組和KD組PBM

3、C中均可出現(xiàn)一定量的NF-κ B活化，其培養(yǎng)上清液中也有FNF-α的表達(dá)，KD組顯著高于Normal組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； (2)加入PMA刺激培養(yǎng)后，兩組PBMC中NF-κB陽(yáng)性細(xì)胞百分比均顯著升高，同時(shí)培養(yǎng)上清液中FNF-α的表達(dá)量也明顯升高，KD組仍明顯高于Normal組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與自然培養(yǎng)組比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； (3)分別加入不同濃度的黃芪注射液(25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml)后

4、，可以觀察到對(duì)PMA刺激的PBMC中NF-κ B活化細(xì)胞百分比明顯降低，相應(yīng)的PBMC培養(yǎng)上清液中TNF-α的表達(dá)量也隨之降低，但KD組仍然高于Normal組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與PMA組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與自然培養(yǎng)組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； (4)三組不同濃度的黃芪注射液隨著劑量的增大，數(shù)據(jù)似乎有減小的趨勢(shì)，但其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義； (5)NF-κ B活化的陽(yáng)性細(xì)胞百分比與TNF-α的表達(dá)含量呈正的直線相關(guān)。 結(jié)論