LRP16基因?qū)θ俗訉m內(nèi)膜癌HEC-1-B細胞的影響.pdf

1、目的:研究攜帶有目的基因LRP16的真核表達質(zhì)粒EX-Y2069-M29,通過陽離子脂質(zhì)體轉染HEC-1-B細胞的轉染效率,了解轉染前后LRP16基因的表達情況,并觀察LRR16對HEC-1-B細胞增殖的影響。
　　 方法:將LRR16真核表達載體EX-Y2069-M29和EX-NEG-M29空質(zhì)粒分別用脂質(zhì)體法轉染體外培養(yǎng)的HEC-1-B細胞,以轉染空載體EX-NEG-M29的HEC-1-B作為空載體對照,以HEC-1-B細胞

2、作陰性對照,在熒光顯微鏡下觀察轉染熒光效應,用RT-PCR方法檢測轉染前后LRP16基因的表達,描繪轉染前后細胞生長曲線,用WST-1法檢測細胞增殖情況。
　　 結果:1.LRP16組、空載體組部分細胞在熒光顯微鏡下發(fā)綠色熒光,陰性對照組細胞未見綠色熒光。2.空白對照組、空質(zhì)粒組和質(zhì)粒轉染組HEC-1-B細胞中LRR16mRNA的相對表達量分別為0.1231±0.0366、0.1486±0.0287和0.5060±0.0198,

3、質(zhì)粒轉染組與其他兩組相比,差異有統(tǒng)計學意義(F=161.547,P=0.0003)。3.轉染前后HEC-1-B細胞的生長曲線見,未轉染的HEC-1-B細胞群體倍增時間為0.8天,對數(shù)生長期在2-6天之間。而轉染LRR16的HEC-1-B細胞群體倍增時間為2天,對數(shù)生長期在4-6天之間,明顯低于非轉染組細胞。4.LRR16組、空載體組及陰性對照組HEC-1-B細胞WES-T比色法測定,LRP16轉染組HEC-1-B細胞在體外能繼續(xù)增殖,但