孕激素對人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞moesin和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、目的：建立人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞hESC體外培養(yǎng)模型，研究孕激素作用下hESC中 moesin的表達(dá)，以及著床因子IL-1β的表達(dá)變化，探討孕激素對hESC細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)蛋白及著床因子的調(diào)節(jié)作用，為胚胎著床、子宮內(nèi)膜容受性建立及分化提供理論依據(jù)。
　　 方法：從因“子宮肌瘤”行全子宮切除術(shù)的婦女子宮標(biāo)本中獲得分泌期子宮內(nèi)膜組織，分離、純化、鑒定后建立人類子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞（hESC）體外模型。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)液中添加激素不同分組：孕激素組（

2、P10-5mol/l）、雌孕激素組（E210-8mol/l+P10-5mol/l）及米非司酮聯(lián)合雌孕激素組（E210-8mol/l+P10-5mol/l+Mif10-5 mol/l）及空白對照組。共培養(yǎng)三天后應(yīng)用細(xì)胞化學(xué)免疫熒光法和免疫印跡法檢測moesin蛋白定位和定量的變化，用ELISA方法檢測細(xì)胞上清液中IL-1β的濃度。各組數(shù)據(jù)之間的比較采用單因素方差分析。
　　 結(jié)果：⑴細(xì)胞化學(xué)免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)moesin主要分布于h

3、ESC的細(xì)胞胞漿及胞膜，少數(shù)出現(xiàn)在細(xì)胞核中,各實(shí)驗(yàn)組和對照組moesin定位無明顯變化。免疫印跡法發(fā)現(xiàn)孕激素組hESC中moesin蛋白表達(dá)顯著高于對照組（P<0.05）；雌孕激素組moesin蛋白也表達(dá)上調(diào)（P<0.05）；雌孕激素組和孕激素組moesin表達(dá)無顯著性差異（P＞0.05）；米非司酮聯(lián)合雌孕激素組hESC中moesin蛋白較雌孕激素組表達(dá)顯著降低（P<0.05）。⑵孕激素組和雌孕激素組hESC細(xì)胞上清液中IL-1β濃度顯

4、著低于空白對照組（P<0.05）；而米非司酮聯(lián)合雌孕激素組hESC細(xì)胞上清液中IL-1β濃度顯著高于雌孕激素組（P<0.05）。
　　 結(jié)論：①孕激素促進(jìn)hESC的moesin表達(dá)上調(diào)，米非司酮通過拮抗孕激素作用，抑制hESC moesin上調(diào),提示moesin可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架重塑介導(dǎo)胚胎著床。②孕激素抑制hESC IL-1β分泌，米非司酮拮抗孕激素作用，促進(jìn)IL-1β分泌，推測孕激素抑制IL-1β分泌利于子宮內(nèi)膜容受性的建