新型合成化合物DIMO后處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù).pdf

1、目的：
　　觀察新型合成化合物 Z-甲基-5-（3,5-二甲氧基苯甲撐基）-2-亞氨-1-咪唑-4-酮（DIMO）是否對大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，并且探究其發(fā)揮作用的信號通路。
　　方法：
　　在體實(shí)驗(yàn)采用86只成年雄性SD大鼠建立急性大鼠在體心肌缺血再灌注（I/R）損傷模型。隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組（Sham組）、單純?nèi)毖俟嘧φ战M（I/R組）、DIMO1mg/kg后處理組（DIMO-1組）、DIMO2mg

2、/kg后處理組（DIMO-2組）。除Sham組外，其余各組均缺血30 min，再灌注4 h。于再灌注4 h末，提取心臟，采用氯化三苯基四氮唑染色法（TTC法）測定心肌梗死范圍；采用免疫印跡法（Western blot技術(shù)）檢測Cathepsin B、Cathepsin L、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表達(dá)水平；采用免疫共沉淀和Western blot檢測RIP1K和RIP3K的相互作用。離體實(shí)驗(yàn)通過培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞，通過氧

3、糖剝奪（OGD）方法建立缺氧缺糖細(xì)胞模型。隨機(jī)分為4組：對照組（non-OGD組）、對照給藥組（non-OGD+DIMO組）、模型組（OGD/R組）、模型給藥組（OGD/R+DIMO組）。OGD3h，復(fù)氧12h后，采用LDH漏出率檢測心肌細(xì)胞損傷；Annexin-V和碘化丙啶（PI）雙染色法檢測心肌細(xì)胞的凋亡壞死率；免疫共沉淀和 Western blot檢測 RIP1K和 RIP3K的相互作用；采用 Western blot檢測Cath

4、epsin B、Cathepsin L、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：
　　與Sham組相比，I/R組心肌梗死范圍增大，心肌細(xì)胞損傷增加，Cathepsin B、Cathepsin L、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表達(dá)上調(diào)（P<0.05），RIP1K表達(dá)上調(diào)（P<0.05）。
　　與I/R組比較，DIMO-1與DIMO-2組心肌梗死范圍減小，心肌細(xì)胞

5、損傷減少，Cathepsin B、Cathepsin L、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表達(dá)下調(diào)（P<0.05），RIP1K表達(dá)下調(diào)（P<0.05）。
　　體外實(shí)驗(yàn)：
　　與non-OGD組比較，OGD/R組Cathepsin B、Cathepsin L、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62蛋白表達(dá)上調(diào)（P<0.05），LDH漏出率和細(xì)胞凋亡壞死率增多（P<0.05）。
　　與OGD/R組比較，OGD/R