山莨菪堿對酒精誘導大鼠腦損傷CB和GFAP表達的影響.pdf

1、研究的目的及意義：酒精中毒和酒精濫用對人類健康的危害正成為日益嚴重的社會問題。酒精中毒者多出現(xiàn)不同程度的學習和記憶障礙，甚至癡呆。酒精誘導腦損傷是研究老年癡呆癥等神經(jīng)退行性疾病(neurodegenerativediseases，ND)時記憶障礙公認的動物模型。而山莨菪堿對酒精誘導腦損傷的細胞保護作用，尚無定論。本研究旨在通過酒精誘導腦損傷模型來模擬建立ND產生的神經(jīng)病理變化及學習、記憶改變，探討其損傷機理以及山莨菪堿這一細胞保護劑對酒

2、精誘導腦損傷的治療作用。 主要內容：1.動物模型的建立：Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，共72只，隨機分成生理鹽水(normalsaline，NS)組、酒精(ethonal，EtOH)組、山莨菪堿(Anisodamine，An)組、山莨菪堿+酒精(Anisodamine+ethonal，An+EtOH)組。在EtOH組，給予20％酒精溶液2g/kg/d，腹腔內(intraperitoneal，ip.)注射，連續(xù)給藥

3、8d。2.觀察大鼠的體重及Morris水迷宮行為的改變。3.應用免疫組織細胞化學方法和western印跡技術分析大鼠海馬結構的神經(jīng)元內維生素D依賴性鈣結合蛋白D28k(Calbindin-D28k,CB)和神經(jīng)膠質細胞內膠質纖維酸性蛋白(GlialFibrillaryAcidicProtein，GFAP)表達的變化。4.山莨菪堿對酒精誘導腦損傷的治療作用。 結果：1.Morris水迷宮行為測定：(1)尋找平臺的潛伏期時間：EtO

4、H組顯著高于NS組、An組、An+EtOH組，P＜0.05。(2)尋找平臺的游泳距離：EtOH組顯著長于NS組、An組、An+EtOH組，P＜0.05，An+EtOH組高于An組，但差異無顯著性意義，P＞0.05。2.免疫組織細胞化學方法的分析：(1)CB表達的變化：在海馬CA1、CA3和齒狀回(dentategyrus，DG)區(qū)，EtOH組CB表達陽性的神經(jīng)元平均灰度值略有降低，但與NS組、An組、An+EtOH組比較，差異無顯著性意

5、義，P＞0.05。(2)GFAP表達的變化：①陽性神經(jīng)膠質細胞計數(shù)分析：在海馬CA1、CA3區(qū)，EtOH組較NS組、An組、An+EtOH組高，其差異有顯著性意義，P＜0.05，An+EtOH組高于An組，但差異無顯著性意義，P＞0.05；在DG區(qū)，四組比較，差異無顯著性意義，P＞0.05。②陽性神經(jīng)膠質細胞平均面積分析：在海馬CA1、CA3區(qū)，EtOH組較NS組、An組、An+EtOH組都高，其差異有顯著性意義，P＜0.05，An+E

6、tOH組高于An組，但差異無顯著性意義，P＞0.05；在DG區(qū)，四組比較，差異無顯著性意義，P＞0.05。3.western印跡分析：GFAP表達的半定量分析，在前皮質、海馬和小腦三部分，四組差異無顯著性意義；在大鼠海馬，CB表達陽性的平均灰度值EtOH組較其他三組低，但差異無顯著性意義，P＞0.05。結論：1.酒精誘導腦損傷模型產生了一定程度的體重降低及學習記憶的變化，表現(xiàn)為EtOH組大鼠尋找平臺的潛伏期時間、游泳距離較NS組、An組