2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、細胞凋亡(Apoptosis)是指細胞在一定的生理或病理條件下,遵循自身的程序,由基因調控的主動的死亡過程。從細胞凋亡這一新視角來看中醫(yī)藥抗腫瘤作用,對于從分子水平揭示中藥的作用機制,篩選新的抗癌中藥具有十分重要的意義。 莪術是姜科姜黃屬多年生草本植物的根莖,中醫(yī)常將莪術與三棱、丹參、白術等配伍應用治療各種腫瘤。莪術醇(Curcumol),又名姜黃環(huán)奧醇,是從莪術揮發(fā)油中提取的有效單體成份,莪術醇抗菌、抗病毒作用在臨床上已廣泛應

2、用,但其抗腫瘤作用國內外研究尚少。本課題對莪術醇抗腫瘤作用及其機制進行研究,力圖使莪術醇成為一種抗腫瘤新藥。 1.目的: 通過檢測莪術醇對體外培養(yǎng)的人胃癌BGC-823細胞增殖的影響、觀察細胞凋亡的形態(tài)學變化、檢測細胞凋亡率以及細胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的變化。探討莪術醇誘導人胃癌BGC-823細胞凋亡的機制,進一步闡明莪術醇抗腫瘤的作用機理,為莪術醇抗腫瘤作用的臨床應用提

3、供實驗依據。 2.方法: 將莪術醇溶于無水乙醇溶液,設實驗A、B、C、D組,其莪術醇濃度分別為12.5、25、50、100μg/mL。對照組用1%的無水乙醇培養(yǎng)基。 采用四氮唑鹽(MTT)法檢測不同濃度的莪術醇對人胃癌BGC-823細胞增殖的影響;采用吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)雙熒光染色及熒光顯微鏡觀察經過不同濃度的莪術醇作用后,人胃癌BGC-823細胞中凋亡細胞的形態(tài)學變化;通過依賴性磷脂結合蛋白(FIT

4、C-Annexin V)與碘化丙啶(PI)雙染法,采用流式細胞術檢測經過不同濃度的莪術醇作用后,人胃癌BGC-823細胞的細胞凋亡率;采用流式細胞術,通過間接熒光標記法測定經過不同濃度的莪術醇作用后,人胃癌BGC-823細胞內活性氧水平的變化。 3.結果: 3.1 MTT法檢測不同濃度莪術醇處理人胃癌BGC-823細胞24、48、72h,均可抑制細胞增殖,且呈濃度、時間依賴性。12.5、25、50、100μg/mL莪術醇

5、作用24、48、72h,實驗組胃癌細胞增殖的抑制率與對照組比較,差異有顯著性(P<0.05)。 3.2熒光顯微鏡觀察到EB為紅色,只能染色死亡細胞核。正常活細胞胞膜完整,EB不能滲透,細胞核不能染色。AO為綠色,可用于染色活細胞。對照組可見整個細胞為綠色,說明為正常活細胞,經莪術醇作用后,整個細胞背景為綠色,細胞膜較完整,細胞核中紅色和綠色重合時為橘紅色,細胞核呈固縮狀或圓珠狀,即為凋亡時的形態(tài)學變化(凋亡小體)。 3.

6、3根據流式細胞術圖譜,FITC+/PI-為凋亡細胞。人胃癌BGC-823細胞經過不同濃度的莪術醇作用后,凋亡細胞比例明顯升高,且呈濃度、時間依賴性。12.5、25、50、100μg/mL莪術醇作用24、48h,實驗組胃癌細胞的凋亡率與對照組比較,差異有顯著性(P<0.05)。 3.4利用流式細胞術檢測細胞內活性氧水平,結果顯示經過不同濃度莪術醇作用人胃癌BGC-823細胞后,細胞內活性氧水平與莪術醇呈濃度、時間依賴性升高。12.

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