非小細胞肺癌患者CD14+HLA-DR--low髓系抑制性細胞特點及與肺癌進展相關(guān)性研究.pdf

1、目的:觀察非小細胞肺癌患者外周血中CD14+HLA-DR-/low細胞頻率、絕對值、表型及功能特點。同時探討NSCLC患者外周血中CD14+HLA-DR-/low細胞變化與腫瘤遠處轉(zhuǎn)移、化療療效及無疾病進展生存之間的關(guān)系。試圖建立預(yù)測NSCLC化療療效的細胞學(xué)指標,并為臨床制定化療聯(lián)合免疫治療方案提供實驗依據(jù)。
　　方法:采集健康對照35例,非小細胞肺癌89例的外周血,流式細胞儀檢測外周血CD14+HLA-DR-/low細胞頻率和

2、絕對值,并分析其常見表面分子的表達情況,并根據(jù)臨床分期和病理類型對各組間進行比較。用CFSE及細胞內(nèi)因子染色方法檢測NSCLC患者外周血CD14+HLA-DR-/low細胞對CD4+與CD8+T細胞的抑制作用。應(yīng)用Real-time PCR技術(shù)和DCFH-DA熒光探針篩選可能的抑制功能相關(guān)分子,并通過相關(guān)阻斷劑實驗明確CD14+HLA-DR-/low細胞抑制機制。并利用CD14+HLA-DR-/low細胞變化特點,分析它們與化療近期療效

3、的關(guān)系。多組實驗結(jié)果間用Kruskal-Wallis H檢驗,對兩組獨立數(shù)據(jù)間進行Mann-Whitney U檢驗,對于配對數(shù)據(jù)之間的檢測使用Wilcoxon matched-pairs t檢驗。對于數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性分析使用Spearman rank相關(guān)性檢驗?；颊呱媲€的繪制采用Kaplan-Meier方法,不同組之間的比較采用Log-rank檢驗。
　　結(jié)果:
　　1.用流式細胞儀檢測非小細胞肺癌(NSCLC)患者外周

4、血CD14+HLA-DR-/low細胞頻率和計數(shù)相對于健康對照均明顯升高;
　　2.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細胞與肺癌的遠處轉(zhuǎn)移及化療近期療效密切相關(guān);
　　3.相對于經(jīng)典的CD14+HLA-DR+細胞,NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細胞仍具有部分單核細胞系的表型特征,但低表達CD16與CD86分子,并喪失同種異基因刺激能力;
　　4.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low

5、細胞能夠抑制CD4+與CD8+T細胞的激活增殖及分泌細胞因子IFN-γ的能力,且發(fā)揮抑制作用需要與靶細胞近距離接觸;
　　5.NSCLC患者CD14+HLA-DR-/low細胞高表達NADPH氧化酶亞基gp91phox和ROS,通過抑制ROS能夠有效恢復(fù)CD4+與CD8+T細胞的功能。
　　結(jié)論:NSCLC患者外周血CD14+HLA-DR-/low細胞通過產(chǎn)生ROS來抑制機體的免疫系統(tǒng),調(diào)節(jié)針對腫瘤的免疫反應(yīng),可能參與非小細