二甲雙胍對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠肝癌發(fā)生的影響及其VEGF、P53表達(dá)的變化.pdf

1、目的:觀察二甲雙胍對(duì)二乙基亞硝胺(Diethylnitrosamine，DEN)和微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR， MC-LR)誘導(dǎo)的大鼠肝癌發(fā)生的影響，檢測(cè)其VEGF、P53水平，通過(guò)VEGF、P53表達(dá)的變化探討二甲雙胍在肝癌的可能的抗腫瘤作用機(jī)制。
　　方法:將60只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、造模組及二甲雙胍組。造模組及二甲雙胍組用二乙基亞硝胺和微囊藻毒素-LR建立大鼠肝癌模型:每5天腹腔注射0.25％DE

2、N溶液(10mg/kg)+藻毒素MC-LR(20ug/kg)1次，連續(xù)16周，誘癌4周為肝細(xì)胞損傷期，8周至12周時(shí)為肝細(xì)胞增生-硬化期，16周時(shí)為肝細(xì)胞癌變期;對(duì)照組注射等量生理鹽水。三組均喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料，二甲雙胍組在此基礎(chǔ)上將二甲雙胍溶于蒸餾水后灌胃(250mg/Kg·d)。三組均于12、16周時(shí)隨機(jī)選取10只處死。大鼠處死后精確稱肝重，記錄肝表面癌結(jié)節(jié)數(shù)，計(jì)算肝指數(shù)（即肝重/體重比）。取肝組織行病理組織學(xué)檢查，免疫組化檢測(cè)VEG

3、F、P53蛋白水平，熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測(cè)VEGFmRNA水平。
　　結(jié)果:
　　1.對(duì)照組大鼠狀況良好，無(wú)異常死亡;DEN+MC-LR造模組12周出現(xiàn)肝硬化，16周出現(xiàn)肝癌;二甲雙胍組病變類似于造模組，但病變程度較同時(shí)期造模組輕。
　　2.二甲雙胍對(duì)DEN+MC-LR誘發(fā)肝癌大鼠肝指數(shù)、肝表面癌結(jié)節(jié)數(shù)的影響（16周）:造模組大鼠肝指數(shù)、肝結(jié)節(jié)個(gè)數(shù)均較正常組大鼠高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜

4、0.05)，但仍高于對(duì)照組。
　　3.二甲雙胍對(duì)DEN+MC-LR誘發(fā)肝癌大鼠VEGF、P53的影響:免疫組化顯示造模組肝組織VEGF、P53蛋白水平較對(duì)照組明顯升高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜0.05)。FQ-PCR顯示造模組肝組織VEGFmRNA較對(duì)照組明顯升高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.DEN+MC-LR是可行的大鼠肝癌誘發(fā)方式。
　　2.二