二甲雙胍對實驗性大鼠肝癌發(fā)生的影響及其VEGF、P53表達的變化.pdf

1、目的:觀察二甲雙胍對二乙基亞硝胺(Diethylnitrosamine，DEN)和微囊藻毒素-LR(Microcystin-LR， MC-LR)誘導的大鼠肝癌發(fā)生的影響，檢測其VEGF、P53水平，通過VEGF、P53表達的變化探討二甲雙胍在肝癌的可能的抗腫瘤作用機制。
　　方法:將60只雄性SD大鼠隨機分為對照組、造模組及二甲雙胍組。造模組及二甲雙胍組用二乙基亞硝胺和微囊藻毒素-LR建立大鼠肝癌模型:每5天腹腔注射0.25％DE

2、N溶液(10mg/kg)+藻毒素MC-LR(20ug/kg)1次，連續(xù)16周，誘癌4周為肝細胞損傷期，8周至12周時為肝細胞增生-硬化期，16周時為肝細胞癌變期;對照組注射等量生理鹽水。三組均喂養(yǎng)標準大鼠飼料，二甲雙胍組在此基礎(chǔ)上將二甲雙胍溶于蒸餾水后灌胃(250mg/Kg·d)。三組均于12、16周時隨機選取10只處死。大鼠處死后精確稱肝重，記錄肝表面癌結(jié)節(jié)數(shù)，計算肝指數(shù)（即肝重/體重比）。取肝組織行病理組織學檢查，免疫組化檢測VEG

3、F、P53蛋白水平，熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測VEGFmRNA水平。
　　結(jié)果:
　　1.對照組大鼠狀況良好，無異常死亡;DEN+MC-LR造模組12周出現(xiàn)肝硬化，16周出現(xiàn)肝癌;二甲雙胍組病變類似于造模組，但病變程度較同時期造模組輕。
　　2.二甲雙胍對DEN+MC-LR誘發(fā)肝癌大鼠肝指數(shù)、肝表面癌結(jié)節(jié)數(shù)的影響（16周）:造模組大鼠肝指數(shù)、肝結(jié)節(jié)個數(shù)均較正常組大鼠高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜

4、0.05)，但仍高于對照組。
　　3.二甲雙胍對DEN+MC-LR誘發(fā)肝癌大鼠VEGF、P53的影響:免疫組化顯示造模組肝組織VEGF、P53蛋白水平較對照組明顯升高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜0.05)。FQ-PCR顯示造模組肝組織VEGFmRNA較對照組明顯升高(P＜0.05)，二甲雙胍組低于造模組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.DEN+MC-LR是可行的大鼠肝癌誘發(fā)方式。
　　2.二