二甲雙胍對(duì)大鼠腎小球系膜細(xì)胞AMPK介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、目的：
　　觀察二甲雙胍(metformin)對(duì)高糖培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞（Mesangial Cells,MCs)腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine5’-monophosphate-activated protein kinase，AMPK），核因子-κB（NF-κB）及炎癥因子單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）表達(dá)及合成的影響，探討其對(duì)腎臟的保護(hù)機(jī)制。

2、
　　方法體外培養(yǎng)MCs，隨機(jī)分為正常糖濃度（NG）組、高糖（HG）組及高糖+不同濃度二甲雙胍（M1、M2、M3）組，48 h后收獲各組細(xì)胞及上清液。采用熒光實(shí)時(shí)定量 PCR法檢測(cè)細(xì)胞NF-κB、MCP-1、ICAM-1及TGF-β1的mRNA含量；Western印跡法檢測(cè)細(xì)胞磷酸化AMPK（p-AMPK）、總AMPK、NF-κBp65，MCP-1，ICAM-1,及TGF-β1的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1）腎小

3、球系膜細(xì)胞可表達(dá)AMPK,NF-κB，MCP-1，ICAM-1和TGF-β1。
　　2）與NG組相比，HG組NF-κB，MCP-1，ICAM-1，TGF-β1的mRNA及蛋白表達(dá)均升高。
　　3）二甲雙胍各組MCs的NF-κB，MCP-1，ICAM-1，TGF-β1的mRNA和蛋白表達(dá)水平降低，且呈一定的濃度依賴性。
　　4）與NG組相比，HG組MCs的p-AMPK蛋白表達(dá)降低。
　　5）二甲雙胍各組MCs的p-

4、AMPK蛋白表達(dá)水平升高（P<0.05），且呈一定的濃度依賴性。
　　6）各組總AMPK的表達(dá)量無(wú)明顯差異。
　　7）相關(guān)性分析：Pearson分析顯示，NF-κBp65與p-AMPKα的蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.473，P<0.05). NF-κB mRNA與 MCP-1(r=0.801，P<0.01)，ICAM-1(r=0.632,P<0.01) andTGF-β1 mRNA(r=0.608,P<0.01)的表達(dá)呈正相