Erbin缺失誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞抗失巢凋亡.pdf

1、目的:細(xì)胞極性和形態(tài)的完整性對于上皮細(xì)胞行使正常的功能至關(guān)重要，上皮細(xì)胞極性喪失及形態(tài)完整性破壞與腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化密切相關(guān)。Erbin屬LAP蛋白家族成員，該家族在維持上皮細(xì)胞的極性及完整性中發(fā)揮重要的作用。Erbin定位于上皮細(xì)胞基底外側(cè)膜，早期研究認(rèn)為，Erbin可能介導(dǎo)Her2受體的膜定位。但是，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，Erbin常與細(xì)胞粘附連接的組分相互作用或與某些參與細(xì)胞-基質(zhì)粘附的蛋白形成復(fù)合物，提示Erbin可能參與細(xì)胞的粘附過

2、程。近年來，Erbin作為支架分子在多條信號通路中的調(diào)控作用亦被逐一揭示。但是，Erbin具有多個(gè)蛋白質(zhì)相互作用結(jié)構(gòu)域，能與這些結(jié)構(gòu)域相互作用的蛋白遠(yuǎn)未被完全發(fā)掘，Erbin的生物學(xué)功能亦遠(yuǎn)未被人們所認(rèn)識。因此，本文旨在探索Erbin在腫瘤中的生物學(xué)功能。
　　方法:應(yīng)用poly-HEMA包被的培養(yǎng)板模擬體外失粘附狀態(tài)，通過流式細(xì)胞術(shù)分析Erbin缺失細(xì)胞以及對照細(xì)胞的凋亡。通過Western blot分析Erbin缺失對不同信號

3、通路分子表達(dá)和磷酸化的影響。通過雙熒光素酶報(bào)告基因分析，Erbin缺失后STAT3啟動(dòng)子活性的變化。應(yīng)用免疫組化染色研究Erbin在宮頸癌組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果:在本研究中，我們通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)，揭示Erbin缺失能增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞抵抗失巢凋亡的能力，促進(jìn)宮頸癌移植瘤在裸鼠體內(nèi)生長和轉(zhuǎn)移。在宮頸癌細(xì)胞中敲低Erbin表達(dá)，可增強(qiáng)IL-6誘導(dǎo)的STAT3磷酸化、入核及轉(zhuǎn)錄激活活性。過表達(dá)組成性激活的STAT3C或通過IL-6激活內(nèi)源性

4、的STAT3均可明顯抑制宮頸癌細(xì)胞的失巢凋亡，而JAK2/STAT3的抑制劑WP1066能逆轉(zhuǎn)Erbin缺失誘導(dǎo)的抗失巢凋亡，表明宮頸癌細(xì)胞中Erbin缺失誘導(dǎo)的抗失巢凋亡是通過活化STAT3而實(shí)現(xiàn)的。我們發(fā)現(xiàn)，IL-6在誘導(dǎo)STAT3活化的同時(shí)，可導(dǎo)致Erbin表達(dá)上調(diào)，過表達(dá)STAT3C亦可顯著誘導(dǎo)Erbin的表達(dá)，而JAK2的抑制劑AG490不僅能抑制STAT3的磷酸化，而且能抑制IL-6誘導(dǎo)的Erbin表達(dá)上調(diào)，敲低Erbin亦