人臍帶間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細胞(MSCs)向心肌細胞分化的可能性,為心肌細胞的移植探索新的細胞來源。
　　方法:從人臍帶華爾通氏膠分離、培養(yǎng)MSCs,用5-氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza)和二甲基亞砜(DMSO)誘導人臍帶間充質(zhì)干細胞的分化。觀察誘導后分化細胞形態(tài)的變化,用免疫細胞化學方法檢測分化的細胞是否表達心肌肌鈣蛋白I(troponin I)、心肌肌鈣蛋白 T(troponinT)和心肌結(jié)蛋白(desmin)

2、, RT-PCR方法測定分化的細胞是否有心肌特異轉(zhuǎn)錄因子(Nkx2.5)和心肌細胞結(jié)蛋白(desmin)的cDNA的表達。透射電鏡觀察分化的心肌樣細胞內(nèi)是否有肌絲的存在,掃描電鏡觀察分化的心肌樣細胞的形態(tài)變化,從不同的層面鑒定誘導分化的心肌樣細胞是否具有心肌細胞的特性和功能?
　　結(jié)果:從人臍帶華爾通膠分離、培養(yǎng)的貼壁細胞,體外生長形態(tài)類似于成纖維細胞,可以維持在未分化狀態(tài)穩(wěn)定增殖,體外增殖超過10代,細胞凍存一個月后復蘇,生長特

3、點與凍存前基本一致。人臍帶MSCs經(jīng)5-aza和DMSO誘導后可向心肌樣細胞分化,分化的細胞表達心肌細胞的標記troponin I、troponinT和desmin。RT-PCR檢測證實,人臍帶MSCs誘導前不表達Nkx2.5和desmin,經(jīng)5-aza和DMSO誘導后,分化的細胞檢測到有心肌特異轉(zhuǎn)錄因子(Nkx2.5)和心肌細胞結(jié)蛋白(desmin)的cDNA的表達。透射電鏡可以觀察分化的細胞漿中有肌絲的存在。
　　結(jié)論:人臍帶

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