單抗及其組合檢測循環(huán)抗原對血吸蟲病診斷的研究.pdf

1、血吸蟲循環(huán)抗原是蟲體自身分泌成分，具有反映活動性感染和蟲負荷，治療后消失較快的特點，能用于療效考核的評價，尋找既滿足敏感性又具有療效考核價值的循環(huán)抗原檢測途徑是血吸蟲病診斷研究面臨的挑戰(zhàn)。血吸蟲特異性抗體檢測有較高的敏感性，但由于病人治療后抗體仍長期存在，抗體檢測不能區(qū)分既往感染和新近感染，難以用于現(xiàn)場診斷和療效考核。 本研究采用單克隆抗體夾心ELISA和常規(guī)ELISA方法，研究和建立了同步檢測血吸蟲循環(huán)抗原和循環(huán)抗體的血吸蟲病

2、復合檢測系統(tǒng)并評估了其診斷效能，分析了復合檢測與循環(huán)抗原和循環(huán)抗體檢測的效果和相互關系，及其在療效考核、個體診斷和疫區(qū)應用上的價值。同時還建立了抗腸相關抗原JPG5株和抗可溶性蟲卵抗原JPS6株單克隆抗體對血吸蟲病診斷的基礎數(shù)據(jù)并予以了評價。在此基礎上，嘗試了單克隆抗體的同類和異類組合對循環(huán)抗原的多表位檢測，以探索改善和提高對血吸蟲循環(huán)抗原診斷效能的途徑。 單克隆抗體JPG3的循環(huán)抗原檢測和抗SEA抗體檢測敏感性分別為78.7％

3、和95.7％；特異性分別為93.7％和96.1％；Youden指數(shù)分別為0.725和0.918；JPG3可以作為循環(huán)抗原檢測的一個探針。對療效考核血清檢測表明：治療半年后循環(huán)抗原和循環(huán)抗體陽性率分別為65.0％和90.0％，治療一年后則分別為55.0％和82.5％，前者顯著低于后者，表明JPG3對循環(huán)抗原的檢測具有一定的療效考核效果，而對循環(huán)抗體檢測則無療效考核價值。 平行檢測與序列檢測的敏感性分別為95.7％與75.9％，特異

4、性為92.2％和99.2％，平行檢測能提高敏感性，序列檢測能提高特異性。平行檢測對疫區(qū)非感染人群陽性率為89.8％，序列試驗為40.7％，后者的高特異性有利于減少對疫區(qū)非感染者的誤檢。 JPG5和JPS6株單抗的檢測敏感性分別為74.3％和78.7％，特異性為96.8％和95.2％，Youden指數(shù)為0.711和0.731，交叉反應均較低。表明兩者的診斷效能基本相同，可用做較好的循環(huán)抗原檢測的備選探針。 治療半年和一年后

5、患者血清，JPG5檢測的陰轉率分別為41.4％和65.5％，JPS6檢測的陰轉率分別為40.1％和43.8％，JPG5和JPS6單抗對治療半年后的療效考核效果相近；JPG5對治療一年后的療效考核優(yōu)于JPS6。表明以腸相關抗原為靶抗原的JPG5比以蟲卵相關抗原為靶抗原的JPS6具有更好的療效考核效果。在JPG3、JPG5和JPS6三株單抗中以JPG5的療效考核價值最高。JPG5+JPG1同類組合和JPS6+JPG1異類組合對循環(huán)抗原多表位

6、檢測敏感性分別為80.1％和73.5％，特異性分別為97.7％和96.1％，Youden指數(shù)分別為0.737和0.696，兩組合診斷效能相近。與單表位檢測比較，兩種組合均未能取得比單獨使用單抗JPG5和JPS6更好的檢測效果或明顯改善診斷效能，本研究采用同步檢測血吸蟲循環(huán)抗原和循環(huán)抗體，建立復合檢測系統(tǒng)，為血吸蟲病防治和診斷提供了新的思路。對不同單抗進行組合后用于對循環(huán)抗原檢測，探索了提高血吸蟲循環(huán)抗原診斷敏感性新途徑。期望復合檢測和組