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文檔簡介
1、利凡諾是國內(nèi)普遍使用的一種中孕引產(chǎn)藥物,實踐證明羊膜腔內(nèi)注射有著較低的并發(fā)癥發(fā)生率,避免了藥物的全身吸收和感染。現(xiàn)今在國內(nèi),羊膜腔內(nèi)注射利凡諾作為政府機構(gòu)或者公共醫(yī)院廣泛合法使用的流產(chǎn)途徑。但是,由于中國傳統(tǒng)男孩偏好觀念的影響,以及獨生子女政策,使得近年來,在B超掃描確認女嬰后,非法使用利凡諾中止妊娠,以獲得再次懷上男孩的機會。這種選擇性生育行為導(dǎo)致我國出生性別比嚴重失衡,報道我國出生人口性別比自20世紀80年代開始偏高且持續(xù)升高,19
2、90年第四次人口普查時出生人口性別比為111:100,2000年第五次人口普查時為117:100,嚴重偏離了正常范圍。這將直接影響經(jīng)濟發(fā)展和社會穩(wěn)定,影響人民群眾的生活質(zhì)量。因此,建立一種靈敏有效的方法對生物樣品中的利凡諾進行定性和定量測定,來對利凡諾的非法濫用進行監(jiān)測顯得尤為重要。 利凡諾(Ethacridine Lactate,Rivanol,Acrinol),又名雷佛奴爾,乳酸依沙吖啶,其化學(xué)名為2-乙氧基-6,9-二氨基
3、吖啶乳酸鹽(2-ethoxy-6,9-diaminoacridinelactate hydrate),是一種強力殺菌劑,它能引起離體與在體子宮的收縮,表現(xiàn)為子宮肌肉收縮頻率增加,幅度或緊張度增大,將利凡諾注入羊膜腔內(nèi),能引起子宮收縮,并能達到排出胎兒和胎盤的引產(chǎn)目的。臨床引產(chǎn)效果可達95%以上,是臨床上中期妊娠引產(chǎn)常用的方法。國內(nèi)外文獻資料中對利凡諾測定方法的報道較少,生物樣品中利凡諾藥物濃度的測定文獻更少,而且難以套用。所以對羊水樣品
4、中的利凡諾藥物濃度進行取樣測定,并進行完整的測定方法學(xué)研究。 具體的研究內(nèi)容包括以下兩個部分: 1.羊水中利凡諾藥物濃度的分光光度法測定 采用紫外-可見分光光度法(ultraviolet and visible spectrophotometry,UV-vis)對羊水中利凡諾的藥物濃度進行測定。由于空白羊水基質(zhì)在相應(yīng)波長也存在吸收,低濃度下難以找到合適的吸收波長對其準確定量。 應(yīng)用熒光分光光度法(spectrof
5、luorometry,SPF)對羊水中利凡諾的藥物濃度進行測定。正丁醇一次提取,在WFY-28型熒光分光光度計上220 nm~760 nm范圍內(nèi)分別進行激發(fā)掃描和發(fā)射掃描。本實驗選用利凡諾檢測的激發(fā)波長為370 nm,發(fā)射波長為495 nm?;厥章蕿?3.5%, RSD為3.0%。該法簡便、快速、靈敏度較好。但是空白羊水在此掃描發(fā)射波長下存在一定強度的發(fā)射光,當(dāng)羊水中的利凡諾衰減到一定濃度時,這種方法很難斷定羊水是否含有利凡諾。所以這種
6、方法存在一定局限性。 2.羊水中利凡諾藥物濃度的高效液相色譜法測定 應(yīng)用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)對羊水中利凡諾的藥物濃度進行測定。采用Waters Spherisorb C18色譜柱(4.6 mm×250 mmx 5 μm),流動相為甲醇-乙腈-0.2 mol/L 乙酸銨(ammonium acetate,NH4AC)(60:37:3,v/v/v),
7、流速為1.0ml/min,熒光檢測器的激發(fā)和熒光波長分別為360 nm和500 nm,柱溫為40℃,采用外標法定量,測定羊水中的利凡諾藥物濃度。在本文條件下,利凡諾保留時間(retention time,RT)約7 min。全程采樣(譜圖紀錄)時間為10~15 min。利凡諾的線性范圍為0.005~1.00 μ g/ml,r=0.9984。利凡諾的檢測限為0.0007 μ g/ml,0.20 μg/ml和0.80 μg/ml質(zhì)量濃度的利
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