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1、目的:探討骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞注射到尿道周作為一種壓力性尿失禁治療方法的潛在可行性,從而為注射療法治療壓力性尿失禁提供一種新的注射材料。 方法:1)體外分離培養(yǎng)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,免疫組化鑒定骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞并檢測(cè)其純度。2)采用活體熒光染料熒光金(Fluoro-Gold)標(biāo)記骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,將標(biāo)記后的細(xì)胞注射到大鼠近端尿道周圍。3)3-4天后處死大鼠,取注射部位組織冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察、免疫組織化學(xué)染色,觀察細(xì)胞存活、分化情況。
2、 結(jié)果:原代培養(yǎng)的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,經(jīng)免疫組化鑒定,骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的純度達(dá)到90%以上。熒光顯微鏡下100%的細(xì)胞胞核被染色標(biāo)記,呈金黃色,熒光持續(xù)存在,細(xì)胞存活率約95%。注射部位的組織切片于熒光顯微鏡下可觀察到熒光標(biāo)記的細(xì)胞,行Desmin免疫組化染色呈陽性。 結(jié)論:成功建立大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞原代培養(yǎng)方法。0.01%的FG標(biāo)記液對(duì)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的胞核染色效果好,細(xì)胞存活率高,適合于細(xì)胞自體移植的標(biāo)記。將標(biāo)記的骨骼肌衛(wèi)星
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