鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性分析與耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、目的:隨著抗菌藥物的廣泛使用,鮑曼不動(dòng)桿菌呈現(xiàn)多重耐藥甚至泛耐藥現(xiàn)象,而且因其分離率高、耐藥廣、病死率高等特性成為治療的難點(diǎn)。因此加強(qiáng)耐藥性監(jiān)測(cè)及耐藥機(jī)制的研究很有必要。文獻(xiàn)報(bào)道某些鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性和其攜帶有移動(dòng)遺傳元件整合子有關(guān)。整合子是一種細(xì)菌基因捕獲和表達(dá)的可移動(dòng)的遺傳單位,定位于染色體和具有廣泛屬主的質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座子上,攜帶位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng),能整合不同的耐藥基因盒,是導(dǎo)致細(xì)菌多重耐藥的重要原因。
　　 為了解我院鮑曼不動(dòng)

2、桿菌的流行趨勢(shì)以及耐藥性,為臨床提供更準(zhǔn)確、有效的用藥指導(dǎo),以控制院內(nèi)感染減少細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。對(duì)我院2009年4月至2010年1月臨床收集的104株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行耐藥分析及整合子檢測(cè)與序列分析,并探討我院臨床分離的的鮑曼不動(dòng)桿菌的整合子攜帶情況,以及整合子與鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥相關(guān)性。
　　 方法:收集2009年4月至2010年1月煙臺(tái)市毓璜頂醫(yī)院住院患者分離的104株鮑曼不動(dòng)桿菌臨床株,其中大部分分離自痰標(biāo)本。用法國(guó)梅里埃公司

3、vitek2Compact全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)鑒定細(xì)菌,瓊脂稀釋法檢測(cè)臨床對(duì)常用17種抗生素的敏感性,并對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥情況進(jìn)行系統(tǒng)分析。PCR擴(kuò)增整合酶基因檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶整合子情況,同時(shí)對(duì)整合子可變區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增及測(cè)序以其了解整合子耐藥基因盒攜帶耐藥基因的情況。選擇整合子可變區(qū)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物相似性條帶,采用Rsa和HindfⅠ切進(jìn)行雙酶切以確定整合子基因盒類型。
　　 結(jié)果:1.鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離菌株科室分布以ICU病

4、房分離率為68.4%為主,標(biāo)本來源大部分為痰73%。藥敏結(jié)果顯示我院2009年4月至2010年1月鮑曼不動(dòng)桿菌呈多重耐藥性,鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦(CPZ/SB)耐藥率為1.2%,對(duì)替加環(huán)素(15.4%)、左旋氧氟沙星(34.4%)、亞胺培南(54.3%)、阿米卡星(59%)、哌拉西林/他唑巴坦(59.4%),對(duì)其他抗生素均在60%以上。2.PCR擴(kuò)增結(jié)果表明104株中有73株菌株含Ⅰ類整合子(陽(yáng)性率為70.2%),未有Ⅱ、Ⅲ類

5、整合子擴(kuò)增陽(yáng)性菌株,且Ⅰ類整合子陽(yáng)性株的耐藥性均高于陰性株。對(duì)Ⅰ類整合子基因盒序列分析表明我院鮑曼不動(dòng)桿菌Ⅰ類整合子攜帶aacA4、catB8和aadAl3種耐藥基因。3.對(duì)同大小整合子可變區(qū)采用雙酶切產(chǎn)生一樣的酶切條后帶型一致。
　　 結(jié)論:1.我院在2009年4月至2010年1月期間,鮑曼不動(dòng)桿菌呈現(xiàn)高度耐藥及嚴(yán)重的多重耐藥現(xiàn)狀,說明我院對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌所致感染治療的抗菌藥物選擇已十分有限。2.我院分離的鮑曼不動(dòng)桿菌主要攜帶Ⅰ

6、類整合子,未有Ⅱ、Ⅲ類整合子檢出。并對(duì)Ⅰ整合子陽(yáng)性的可變區(qū)進(jìn)行耐藥基因盒檢測(cè),結(jié)果陽(yáng)性檢出率為70.2%。顯示出Ⅰ類整合子在鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥中起到重要作用,且與多重耐藥性密切相關(guān)。Ⅰ類整合子可變區(qū)序列分析顯示其所攜帶的3個(gè)耐藥基因?yàn)閍acA4,aadAl和catB8,說明aacA4-catB8-aadA1是這兩年本批鮑曼不動(dòng)桿菌中最流行的一種整合子。3.對(duì)整合子可變區(qū)采用雙酶切產(chǎn)生一樣的酶切條帶。說明這些整合子酶切位點(diǎn)是完全一致,屬