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文檔簡介
1、目的:進(jìn)行EPC移植,觀察內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)對(duì)急性缺血再灌注損傷(IRI)大鼠腎組織形態(tài)和功能的影響,探討EPCs對(duì)腎臟急性IRI的影響及其可能機(jī)制。
方法:采用Ficoll密度梯度離心法分離獲取骨髓單個(gè)核細(xì)胞,體外定向誘導(dǎo)、擴(kuò)增培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs),并用氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)熒光染料標(biāo)記;將45只雄性SD大鼠隨機(jī)分為三組,即EPCs移植組(EPCs組,n=15),對(duì)照組(IRI組,n=15),假手術(shù)組(Sh
2、am組,n=15)。EPCs組夾閉雙側(cè)腎蒂45min,再灌注后經(jīng)股靜脈移植用CM-Dil標(biāo)記的EPCs;IRI組夾閉雙側(cè)腎蒂45min,再灌注后經(jīng)股靜脈注入等量生理鹽水;Sham組假手術(shù)后經(jīng)股靜脈注入等量生理鹽水。觀察:(1)EPCs移植對(duì)腎臟IRI后不同時(shí)間點(diǎn)血肌酐、尿素氮、腎組織形態(tài)學(xué)和細(xì)胞凋亡的影響;(2)移植的EPCs對(duì)損傷腎小管周毛細(xì)血管的修復(fù)作用;(3)CM-Dil標(biāo)記的EPCs在腎組織中的分布特征。
結(jié)果:經(jīng)CM
3、-Dil熒光染料標(biāo)記的EPCs陽性率接近100%,IRI組、EPCs組大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)均顯著高于Sham組,但EPCs組血BUN、Scr水平卻較同一時(shí)間的IRI組低(P<0.05);腎小管間質(zhì)損傷程度及腎小管上皮細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯下降(P<0.01);EPCs組腎小管周毛細(xì)血管密度明顯增加(P<0.01);VEGF表達(dá)水平較IRI組明顯升高(P<0.05);熒光顯微鏡顯示移植的EPCs主要分布于大鼠腎臟皮髓交界處,且
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