溶血磷脂酸抑制順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究.pdf

1、目的： 研究表明癌前狀態(tài)細(xì)胞凋亡異常，是腫瘤發(fā)生的重要原因，同時(shí)抗凋亡也是存活的一種重要方式。隨著對(duì)細(xì)胞凋亡研究的深入，人們開(kāi)始發(fā)現(xiàn)多數(shù)抗癌藥物是通過(guò)不同渠道誘導(dǎo)敏感細(xì)胞凋亡而發(fā)揮作用的。有研究表明溶血磷脂酸(LPA)與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，可因靶細(xì)胞的種類不同，或LPlA的濃度不同等而導(dǎo)致促凋亡或抗凋亡截然不同的生物學(xué)效應(yīng)，甚至在某些細(xì)胞類型可導(dǎo)致增殖和凋亡的雙重效應(yīng)，且其機(jī)制尚不明確。本研究的目的在于探討LPA對(duì)順鉑(DDP)誘

2、導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制，并為臨床治療卵巢癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 體外培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞株SKOV3；采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)LPA對(duì)順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞株SKOV3增殖活性的影響；用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析LPA對(duì)順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期的影響；DNA片段凝膠電泳觀察凋亡細(xì)胞的DNA“梯狀”條帶；Hocilest 33258熒光染色觀察凋亡細(xì)胞；半定量RT-PCR的方法檢測(cè)LPA處理前后的卵巢癌

3、細(xì)胞中的Bcl-2、Bcl-xl和Bax、Bad的mRNA表達(dá)的水平。 結(jié)果： DDP對(duì)SKOV3細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用呈量效和時(shí)效依賴關(guān)系。可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和G<,0>-G<,1>期阻滯；LPA能降低順?shù)亴?duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，同時(shí)降低S期的比例和凋亡率；RT-PCR結(jié)果表明LPA作用后的細(xì)胞Bcl-2表達(dá)明顯增高，而B(niǎo)ax的表達(dá)則降低。 結(jié)論： LPA可以抑制順鉑誘導(dǎo)的卵巢癌細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制可能是通過(guò)細(xì)胞