RNA干擾靶向低氧誘導(dǎo)因子-1α治療胃癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、低氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-lalpha，HlF-1α)是轉(zhuǎn)錄因子-低氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia inducible factor,HIF-1)的氧調(diào)節(jié)亞基，是一種缺氧依賴性蛋白質(zhì)，起著主要缺氧調(diào)節(jié)作用，決定HIF-1活性。HIF-1a在正常氧分壓時(shí)很快被泛素依賴的蛋白水解酶水解，缺氧時(shí)在細(xì)胞內(nèi)很快穩(wěn)定并聚集，蛋白表達(dá)水平迅速增加，與HIF-1β結(jié)合構(gòu)成異源二聚體，HIF-1大量表達(dá)，活性顯

2、著增高，進(jìn)而啟動(dòng)涉及改善低氧條件的一系列基因表達(dá)，腫瘤細(xì)胞通過(guò)糖酵解速率提高和多血管體系形成，對(duì)低氧環(huán)境發(fā)生一系列適應(yīng)性反應(yīng)，在維持腫瘤細(xì)胞的能量代謝、新血管生成、促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移中起重要作用，同時(shí)增加了腫瘤對(duì)化放療的抗拒性。 RNA干擾(RNA interfering，RN,Ai)是一種轉(zhuǎn)錄后基因沉默(Post-transcriptional gene silence，PTGS)的基因阻斷技術(shù)，近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞

3、抑制基因表達(dá)。通過(guò)RNase III內(nèi)切酶Dicer的作用產(chǎn)生有活性的小的21-23nt干擾性RNA(short interence RNA，siRNA)，介導(dǎo)其互補(bǔ)同源mRNA序列的特異性降解，沉寂目的基因的表達(dá)。 本課題采用RNAi技術(shù)，設(shè)計(jì)并合成針對(duì)HIF-1α基因的siRNA，轉(zhuǎn)染胃腺癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞，并進(jìn)行裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)HIF-1αmRNA 水平和蛋白水平表達(dá)的變化；觀察siRNA對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影