甜瓜外植體體胚誘導(dǎo)研究.pdf

1、本文綜述了植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生的機(jī)理、意義及其主要影響因素等方面的研究進(jìn)展，對甜瓜體細(xì)胞胚發(fā)生的條件和體細(xì)胞胚發(fā)生過程中的影響因素進(jìn)行了研究，并對體細(xì)胞胚發(fā)生過程進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)觀察，找出了甜瓜體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的最佳外植體及其誘導(dǎo)最適條件，為甜瓜在基因轉(zhuǎn)導(dǎo)、人工種子制作奠定了一定基礎(chǔ)，本試驗(yàn)研究的主要結(jié)果如下： 1．比較了兩種甜瓜在愈傷誘導(dǎo)率與不定芽分化率。其中雜交皇后較黃醉仙容易誘導(dǎo)愈傷組織。基本培養(yǎng)基以MS最好，子葉與子葉節(jié)誘導(dǎo)體胚的

2、最佳培養(yǎng)基均為：MS+6-BA1.0mg.L<'-1>+2.4-D0.1mg.L<'-1>。 2．本實(shí)驗(yàn)中子葉和子葉節(jié)是甜瓜體細(xì)胞胚誘導(dǎo)的最佳外植體，其體胚發(fā)生有直接和間接兩種途徑且主要是通過間接途徑為主，以真葉、下胚軸和子房均未誘導(dǎo)出胚性愈傷組織和胚狀體。 3．甜瓜體細(xì)胞胚誘導(dǎo)中，6-BA和2，4-D混合使用可誘導(dǎo)子葉和子葉節(jié)發(fā)生體胚。通過DPS軟件進(jìn)行方差分析，6-BA對其體胚誘導(dǎo)占主導(dǎo)效應(yīng)。 4．通過對甜瓜

3、愈傷組織石蠟切片觀察表明，胚性愈傷組織的細(xì)胞排列緊、細(xì)胞核大，非胚性愈傷組織的細(xì)胞排列疏松、細(xì)胞核小。體細(xì)胞胚發(fā)生從胚性細(xì)胞開始，經(jīng)歷早期原胚、球形胚、心形胚和魚雷胚幾個階段，最后到成熟子葉胚，整個過程與合子胚發(fā)育過程相似。 5．對甜瓜胚性愈傷組織進(jìn)行了可溶性蛋白含量、SOD活性和POD活性的測定。可溶性蛋白含量與酶活性變化具有一定規(guī)律性，顯示出2個峰值；不同外植體脫分化后的細(xì)胞組織生理生化指標(biāo)差異顯著，受脫分化前器官組織類型的