生菜中吡蟲啉的殘留測定及生物標(biāo)志物的實驗研究.pdf

1、研究目的: 吡蟲啉是一種新型氯代煙堿類內(nèi)吸性廣譜殺蟲劑，其胃毒與觸殺作用較為突出。吡蟲啉類殺蟲劑的作用機制與其他殺蟲劑不同，與其他殺蟲劑一般無交互抗性。由于它高效、低毒、殺蟲譜廣、持效期長，吡蟲啉被大量廣泛的使用，結(jié)果造成對果蔬等農(nóng)作物和環(huán)境的污染。因此我們急需進(jìn)行果蔬等試樣中該農(nóng)藥的凈化及測定方法研究，建立一種簡單、快速、高效的吡蟲啉殘留監(jiān)測技術(shù)，以便及時、準(zhǔn)確地對污染情況進(jìn)行分析、監(jiān)測，有效防止和減少對農(nóng)作物和環(huán)境的污染，并

2、通過進(jìn)行不同濃度吡蟲啉脅迫對蔬菜體內(nèi)抗氧化酶活性、蛋白系統(tǒng)及谷胱甘肽的影響的研究，搞清不同濃度脅迫與蔬菜體內(nèi)上述活性物質(zhì)之間的劑量一效應(yīng)關(guān)系，搞清蔬菜中吡蟲啉殘留量與上述活性物質(zhì)之間劑量一效應(yīng)的關(guān)系，初步建立農(nóng)藥污染敏感指示生物標(biāo)志物的篩選過程，以期找到遭受該農(nóng)藥脅迫時，植物體反應(yīng)比較敏感的生物標(biāo)志物，作為該農(nóng)藥污染的早期診斷指標(biāo)。 研究方法: 1．種植玻璃生菜4個小區(qū)，試驗前不施肥，不噴藥。當(dāng)幼苗長至10cm時第1次噴

3、藥，以后每隔2d噴1次，共噴施3次。三個小區(qū)施藥濃度分別為0.1％(高)、0.02％(中)、0.005％(低)(推薦使用量)，另設(shè)一不噴藥的空白對照小區(qū)。最后一次噴灑吡蟲啉后的第0d、1d、3d、5d、7d、9d、11d，按照算雙對角線法分別采取健康生長的玻璃生菜葉片。每次取樣時，每個濃度取三個平行樣。取樣分別進(jìn)行吡蟲啉殘留測定和抗氧化物酶(過氧化物酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶)活性、多酚氧化酶活性、谷胱甘肽和蛋白質(zhì)含量的測定。

4、 2．采用二氯甲烷提取、氧化鋁和硅鎂吸附劑層析柱凈化、石油醚淋洗、甲醇洗脫、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮、高效液相色譜法(HPLC)檢測其含量。 3．過氧化物酶(POD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、谷胱甘肽(GSH)含量、蛋白質(zhì)含量分別采用愈創(chuàng)木酚法、紫外吸收法、NBT光照還原法、分光光度法、Ellman法和考馬斯亮藍(lán)G-250染色法。 結(jié)論: 1．本實驗所采用的前