梗阻性黃疸對腸粘膜屏障功能影響及烏司他丁干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：梗阻性黃疸(以下簡稱梗黃)的治療一直是外科一大難題。盡管麻醉水平、手術(shù)技術(shù)等有了很大提高，但其術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率和死亡率并無明顯降低。研究發(fā)現(xiàn)，腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素移位是導(dǎo)致梗黃繼發(fā)感染及多臟器功能衰竭的主要原因，而腸粘膜屏障功能損害可能是其發(fā)生的關(guān)鍵。因此，積極開展梗黃對腸粘膜屏障功能影響的研究并探討如何改善和保護之具有重要意義。但以往有關(guān)這方面的研究大多為單一較長時相觀察，或檢測指標(biāo)較少，尤其是目前認(rèn)為評價腸屏障功能的較好指標(biāo)-血漿

2、D-乳酸的檢測鮮有應(yīng)用。烏司他丁(UTI)是尿胰蛋白酶抑制劑，有多種特殊的藥理作用：除對多種蛋白酶有抑制作用外，還有改善休克時的循環(huán)狀態(tài)，穩(wěn)定溶酶體膜，清除氧自由基，抑制炎癥介質(zhì)的釋放等功能。在臨床上已廣泛應(yīng)用于急性胰腺炎、休克、體外循環(huán)的治療及抗手術(shù)刺激等。但在梗黃治療中的應(yīng)用較少，尤其有關(guān)它對梗黃腸粘膜屏障功能影響的研究少有報道。本實驗通過建立S-D大鼠梗黃模型，并用UTI干預(yù)，進(jìn)行多時相的隨機分組對照研究，觀察或檢測反映腸粘膜結(jié)構(gòu)

3、的組織形態(tài)學(xué)變化、反映腸通透性的血D-乳酸水平、反映腸氧化應(yīng)激的腸組織中MDA及SOD的含量、反映腸屏障功能受損的血內(nèi)毒素及腸外組織臟器細(xì)菌移位率改變等多個指標(biāo)，旨在探討梗黃對腸粘膜屏障功能的影響及UTI的保護作用，為臨床防治提供實驗依據(jù)。 方法：1實驗對象及分組：將72只雄性S-D大鼠隨機均分為3組：假手術(shù)組(A組)、梗黃組(B組)、UTI干預(yù)組(C組)，每組又分術(shù)后3天、5天、7天、10天四個時相，每個時相6只。2實驗動物模

4、型制備及處理：B組和C組通過雙重結(jié)扎膽總管制成梗黃模型。A組只分離而不結(jié)扎膽總管。C組從術(shù)后第1天始每天腹腔注射UTI40000IU/kg，A組和B組則用等量生理鹽水作對照，1次/d，直至動物處死前一天。3監(jiān)測指標(biāo)：按上述不同時相于動物處死前抽下腔靜脈血檢測各組肝腎功能有關(guān)指標(biāo)、血漿內(nèi)毒素及D-乳酸水平，取回腸末端組織測其中的丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量，取腸系膜淋巴結(jié)、肝、脾組織行細(xì)菌培養(yǎng)，光鏡觀察末端回腸組織形態(tài)學(xué)

5、改變，并用病理圖像分析系統(tǒng)測量腸絨毛高度及粘膜厚度。4統(tǒng)計學(xué)處理：計量資料組間比較采用方差分析；計數(shù)資料采用x2檢驗。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果：1B組各時相肝、腎有關(guān)指標(biāo)較A組明顯升高，差異有顯著性意義(P＜0.01)；C組較B組測定值降低(P＜0.01)；C組與A組相比，部分時相腎功能差異無顯著性(P＞0.05)。 2B組各時相血漿內(nèi)毒素、D-乳酸水平均高于A組(P＜0.01)，且隨時間

6、的延長呈進(jìn)行性增高的趨勢；C組則較B組降低(P＜0.01)；C組較A組仍升高，但術(shù)后3天組差異無顯著性(P＞0.05)。 3B組各時相腸組織中MDA含量均高于A組，SOD含量較A組降低(P＜0.01)，且隨時間的延長呈進(jìn)行性增高或降低的趨勢；C組則較B組MDA降低，SOD升高，(P＜0.01或P＜0.05)；C組與A組相比，術(shù)后3天組差異無顯著性(P＞0.05)。 4B組各時相小腸絨毛高度、粘膜厚度均低于A組(P＜0.0

7、1)，且隨時間的延長呈進(jìn)行性降低的趨勢；C組則較B組升高(P＜0.01或P＜0.05)；C組較A組仍降低，但術(shù)后3天組差異無顯著性(P＞0.05)。 5B組細(xì)菌移位率為37.5％，A組為0％，二者比較差異有顯著性(P＜0.01)；C組細(xì)菌移位率為8.3％，明顯低于B組(P＜0.05)。C組與A組相比，差異無顯著性(P＞0.05)。細(xì)菌移位最多的部位是腸系膜淋巴結(jié)(8/72)，菌種鑒定結(jié)果主要是G菌，以大腸桿菌最多見。 6

8、B組術(shù)后第3天即見腸粘膜輕度萎縮，絨毛不規(guī)整，間質(zhì)水腫明顯，隨時間推移，病變進(jìn)行性加重，至術(shù)后第10天可見腸壁變薄，粘膜明顯萎縮，絨毛稀疏、倒伏，短縮、融合，上皮脫落；C組與B組各對應(yīng)時相相比，腸粘膜病理改變明顯減輕；A組回腸末端腸粘膜結(jié)構(gòu)基本正常。 結(jié)論：1梗黃早期即可導(dǎo)致腸粘膜屏障功能受損，且隨著梗阻時間延長呈進(jìn)行性加重趨勢。2腸粘膜屏障功能受損可能是梗黃發(fā)生內(nèi)毒素血癥和細(xì)菌移位的主要原因。3檢測血漿D-乳酸水平可及時評價梗