A藥固體分散體膠囊的研制.pdf

1、目的：A藥是從土壤中一種鏈霉菌株發(fā)酵產(chǎn)物中分離出來的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素，是一種新型的免疫抑制劑。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與臨床應(yīng)用研究發(fā)現(xiàn)，A藥的免疫抑制作用比環(huán)孢霉素A(CsA)高10～100倍，而不良反應(yīng)更少。臨床上廣泛應(yīng)用于器官移植的抗排異反應(yīng)，尤其是肝移植。 然而，A藥在水中幾乎不溶，溶解度為1～2ug/ml，高度依賴膽汁吸收和廣泛的胃腸道代謝使得其口服生物利用度低，狗口服1mg后的最高血．藥濃度僅為0.4ng/ml，限制了其在臨床的

2、廣泛應(yīng)用。木實(shí)驗(yàn)對(duì)A藥的理化性質(zhì)進(jìn)行了研究，將其制成固體分散體，再進(jìn)一步制成膠囊，提高了A藥在水中的溶解度，從而提高了藥物的溶出度及生物利用度，為廣泛的臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。 方法：A藥固體分散體膠囊的制備：在資料和預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，初步確立了A藥固體分散體膠囊的處方和制備工藝的篩選范圍，根據(jù)A藥和輔料的理化性質(zhì)，確定溶劑法為A藥固體分散體膠囊的制備方法。以溶出度和穩(wěn)定性為指標(biāo)，對(duì)五個(gè)處方因素、三個(gè)工藝因素進(jìn)行了單因素考察，確定了攪

3、拌速度、干燥溫度、粉碎過篩目數(shù)三個(gè)工藝因素的具體條件，然后在單因素考察的基礎(chǔ)上，以藥物與載體的比例、藥物與崩解劑PVPP的比例、藥物與乳糖的比例為考察因素，以溶出度和操作難易程度為指標(biāo)，設(shè)討三因素三水平的正交實(shí)驗(yàn)，對(duì)處方進(jìn)行優(yōu)化，對(duì)評(píng)分結(jié)果進(jìn)行極差分析，確立了A藥固體分散體膠囊的最佳處方。按最優(yōu)制備工藝和處方，制備三批A藥固體分散體膠囊，測(cè)定藥物的溶出度，考察制備工藝的穩(wěn)定性。 A藥固體分散體膠囊的檢測(cè)方法：在文獻(xiàn)報(bào)道和預(yù)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，建

4、立高效液棚分析方法(HPLC)，測(cè)定三批A藥固體分散體膠囊的含最和溶出度。色譜條件如下：色譜柱：Hypeysil-ODS C<,18>梓(4.6×250mm，粒徑5μm)，柱溫：60℃，流動(dòng)相：0.1％磷酸：乙腈(30:70)，流速：1 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm。 溶出度方法采用中國(guó)藥典2005版二部附錄XC(溶出度測(cè)定法)第三法(小杯槳法)，轉(zhuǎn)速為100r/min，0.2％的SDS溶液為溶出介質(zhì)，0.5h取樣后H

5、PLC法測(cè)定，記錄色譜圖，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物溶出度。 A藥固體分散體膠囊的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：將按最優(yōu)處方和工藝制備的A藥固體分散體膠囊分別進(jìn)行高溫、高濕、強(qiáng)光條件下的影響因素實(shí)驗(yàn)，考察高溫．(40℃、60℃)、高濕(相對(duì)濕度分別為75％飽和NaCl溶液和92.5％的飽和KNO<,3>溶液)和強(qiáng)光(4500Lx)對(duì)A藥固體分散體穩(wěn)定性的影響，從而確定膠囊的外包裝材料。考察其在加速條件(溫度40℃、相對(duì)濕度75％放置六個(gè)月)及長(zhǎng)期條件(

6、室溫放置九個(gè)月)的穩(wěn)定性。 A藥固體分散體膠囊的藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)：以家犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以國(guó)外生產(chǎn)的A藥固體分散體膠囊為對(duì)照品，采用兩制劑、兩周期雙交義自身對(duì)照設(shè)計(jì)，對(duì)自制的A藥固體分散體膠囊進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究，并與國(guó)外對(duì)照品進(jìn)行了生物等效性評(píng)價(jià)。采用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immunosorbantassay，ELISA)測(cè)定A藥的血藥濃度，采用3p97程序計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，計(jì)算相對(duì)生物利用度，經(jīng)方差分析及雙單側(cè)t

7、檢驗(yàn)評(píng)價(jià)A藥同體分敞體膠囊與國(guó)外對(duì)照品的生物等效性。 結(jié)果：A藥固體分散體膠囊的制備：通過單因素考察，確定了處方條什：羥丙甲纖維素(HPMC)為載體，95％乙醇為溶劑，并將A藥與HPMC的用量比例、A藥與PVPP的用量比例、A藥與乳糖的用量比例作為進(jìn)一步考察的因素;確定了工藝條件：攪拌速度為300 r/min，干燥溫度為40℃，整理過篩木數(shù)為80目。對(duì)需進(jìn)一步考察的處方的三個(gè)因素作正交實(shí)驗(yàn)，極差分析結(jié)果顯示：A藥與HPMC的比例

8、影響最大，得到的優(yōu)化處方為：A藥與HPMC的比例為1：2、A藥與PVPP的比例為1：3、A藥與乳糖的比例為1：4。按最優(yōu)處方和工藝制備三批樣品(060301、060302、060303)，0.5h測(cè)定溶出度為91.15％，90.00％，90.52％，藥物溶出具有重現(xiàn)性，說明制備工藝穩(wěn)定可控。 A藥固體分散體膠囊制備的方法：將處方量的A藥粉末和處方量的羥丙甲纖維素(HPMC)溶于95％乙醇中，攪拌混勻，按處方量加入變聯(lián)聚維酮(P

9、VPP)和乳糖，室溫一F，不斷攪拌揮發(fā)溶劑至半固體狀態(tài)，40℃真空減壓干燥，干品粉碎過篩(80 H)得固體分散體粉末，測(cè)定含量，與填充劑微晶纖維素(PH101)、潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂混合均勻，灌裝于膠囊殼中。 A藥固體分散體膠囊的檢測(cè)方法：高效液相法(HPLC)測(cè)定含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線為: Y=20119793.26x+315141.04r=0.9999，A藥的檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，方法平均惻收率為99.81％，日內(nèi)精密度為2.0％，1.

10、1％，2.3％，日問精密度為2.2％，1.8％，2.0％，符合中國(guó)藥典規(guī)定。按最優(yōu)處方和工藝制備的三批A藥固體分散體膠囊，HPLC測(cè)定含量結(jié)果為：三批A藥膠囊的含量分別為標(biāo)示量的103.4％、102.3％、101.2％，均在限定的90～110％的范圍內(nèi)。 HPLC測(cè)定溶出度的標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Y=59433X-11324r=0.9998，A藥的檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，溶出介質(zhì)為0.2％的SDS水溶液，方法平均回收率為100.3％，日內(nèi)精密度為1

11、.5％，1.4％，2.1％，H間精密度為1.8％，1.9％，2.3％，符合中國(guó)藥典規(guī)定。自制A藥膠囊(060301)與市售A藥膠囊進(jìn)行溶出度比較，結(jié)果為：自制A藥膠囊的溶出度為89.30％，市售A藥膠囊的溶出度為88.80％，說明自制A藥固體分散體膠囊與市售A藥膠囊溶出度達(dá)到一致。 A藥固體分散體膠囊的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：A藥固體分散體膠囊在高溫、高溫條件下,性狀沒有變化，溶出度和含量下降明顯，故A藥固體分散膠囊對(duì)高溫、高濕均比較敏感

12、，需防潮的包裝材料。在強(qiáng)光照射條件下，性狀、含量及溶出度均無(wú)顯著性差異，表明A藥固體分散體膠囊對(duì)光穩(wěn)定。加速實(shí)驗(yàn)在放置一個(gè)月、二個(gè)月、三個(gè)月、六個(gè)月及長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)在放置三個(gè)月、六個(gè)月和九個(gè)月后取樣做檢測(cè)，各指標(biāo)無(wú)顯著變化，表明A藥同體分散體膠囊在加速實(shí)驗(yàn)六個(gè)月和長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)九個(gè)月的實(shí)驗(yàn)條件下穩(wěn)定。 A藥固體分散休膠囊的藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)：采用3P97程序?qū)ψ灾艫藥膠囊與國(guó)外對(duì)照品的血藥濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，依AIC法判斷其藥時(shí)曲線符合單室模型，

13、各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)為： 自制A藥固體分散體膠囊： C<,max>：52.06±7.08 ng/mL T<,max>：1.41±0.34 h AUC<,(0-t>)：433.70±68.08 min．ng．ml<-1> AUC<'(0～∞)>：571.87±147.63 min.ng.ml<'-1>外對(duì)照物A藥膠囊： C<,max>：43.12±11.80 ng/mL T<,max>：1.31±0.25 h AUC(0．t)：

14、393.07±71.20 min.ng.ml<'-1> AUC<'(0～∞)>：519.92±95.65 min.ng.ml<'-1> 自制A藥膠睫的相對(duì)生物利用度分別為112.5％±2.07％和112.1％±3.39％，經(jīng)方差分析及雙單側(cè)t檢驗(yàn)，自制生產(chǎn)的A藥膠囊的AUC<,(0-t)>和AUC<'(0～∞)>的90％可信限分別為98.6％～123.2％和84.4％～115.0％，均落在國(guó)外對(duì)照品的80％～125％范圍內(nèi)；C<,max

15、>的90％可信限為99.8％～130.8％，在國(guó)外對(duì)照品C<,max>的70％ 143％范圍內(nèi)：T<,max>經(jīng)非參數(shù)榆驗(yàn)與國(guó)外對(duì)照品無(wú)顯著性差異。因此，自制生產(chǎn)的A藥膠囊與國(guó)外牛產(chǎn)的A藥膠囊生物等效。 結(jié)論：以上各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明：A藥制備成固體分散體膠囊，能夠大大增加原料藥溶解度，提高其溶出度及生物利用度，與國(guó)外對(duì)照品達(dá)到生物等效，從而保證了在臨床應(yīng)用的療效。制備該藥物的固體分敞體所采用的制備方法適合工業(yè)大生產(chǎn)，穩(wěn)定性良好，具有