攜帶野生型PTEN基因的重組腺病毒（Ad-PTEN）治療子宮內(nèi)膜癌的實驗研究.pdf

1、該研究的目的是構(gòu)建攜帶野生型PTEN基因的腺病毒(Ad-PTEN),體外、體內(nèi)轉(zhuǎn)染該基因突變的子宮內(nèi)膜癌RL95-2細(xì)胞,觀察其對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖抑制、凋亡誘導(dǎo)作用及其機理;應(yīng)用裸鼠動物模型,ex vivo觀察其對RL95-2細(xì)胞裸鼠致瘤性的影響,in vivo觀察體內(nèi)基因治療效果,以及基因治療后腫瘤組織內(nèi)相關(guān)基因、蛋白、雌孕激素受體表達(dá)的改變,旨在為子宮內(nèi)膜癌的基因治療進(jìn)行一些有益的嘗試,并提供有一定意義的實驗數(shù)據(jù).從該研究中初步得

2、出以下結(jié)論:1.成功構(gòu)建了攜帶野生型PTEN cDNA序列的復(fù)制缺陷型重組腺病毒Ad-PTEN,并能在轉(zhuǎn)染的子宮內(nèi)膜樣腺癌RL95-2細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄和表達(dá).2.復(fù)制缺陷型腺病毒是PTEN基因的良好載體,對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)染效率;體外外源性野生型PTEN基因轉(zhuǎn)染能夠顯著抑制含該基因突變的RL95-2細(xì)胞的增殖.3.將細(xì)胞周期阻斷在G1期,抑制S期合成,激活caspase-3凋亡信號通路,誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡,是PTEN基因抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)

3、胞增殖的主要作用機制之一.4.裸鼠體內(nèi)實驗證實,PTEN基因體外轉(zhuǎn)染RL95-2細(xì)胞后,可使其致瘤能力完全喪失;Ad-PTEN腫瘤內(nèi)注射,使腫瘤生長明顯減慢,療效顯著,同時未發(fā)現(xiàn)有明顯毒性反應(yīng).提示Ad-PTEN用于子宮內(nèi)膜癌的基因治療具有潛在的應(yīng)用價值.5.Ad-PTEN基因治療后,經(jīng)免疫組化及TUNEL染色,發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞增殖減慢(PCNALI明顯下降)、凋亡增加,孕激素受體的表達(dá)由陰性轉(zhuǎn)為陽性,ER、耐藥基因MDR1編碼的P-gp泵