靜脈用魚腥草注射劑致敏性評(píng)價(jià)和比較藥理學(xué)研究.pdf

1、魚腥草注射劑作為中藥注射劑臨床嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生的代表藥，其再研究和再評(píng)價(jià)工作具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。對(duì)魚腥草注射劑開展安全性再評(píng)價(jià)工作，必須從制劑工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥理毒理、臨床使用及藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)等方面進(jìn)行全面的科學(xué)評(píng)估。本課題組對(duì)魚腥草注射劑臨床不良反應(yīng)的因?yàn)檫M(jìn)行系統(tǒng)分析研究，明確魚腥草注射劑中的主要致敏物質(zhì)，完善生產(chǎn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，改進(jìn)魚腥草注射劑制備工藝，從而提高了注射劑的安全性、有效性和穩(wěn)定性，為其恢復(fù)生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。本論文主

2、要包括以下四個(gè)內(nèi)容：
　　 1文獻(xiàn)綜述
　　 本論文文獻(xiàn)綜述部分系統(tǒng)論述了三個(gè)方面的內(nèi)容：①魚腥草及其制劑研究進(jìn)展；②魚腥草注射劑臨床不良反應(yīng)因?yàn)榉治龊蛯?duì)策；③注射用輔料吐溫80和羥丙基—β—環(huán)糊精研究進(jìn)展。以上這些論述為論文的整體研究奠定了理論基礎(chǔ)。
　　 2魚腥草注射液原、新制劑及其輔料的致敏性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)研究
　　 本研究分別采用小鼠、Beagle犬和食蟹猴對(duì)魚腥草注射液原、新制劑及其輔料進(jìn)行致敏性評(píng)價(jià)

3、研究。類過敏實(shí)驗(yàn)以單次靜脈恒速注射給藥，觀察給藥后動(dòng)物的行為變化和血中組胺含量。過敏實(shí)驗(yàn)為三次隔日靜脈注射給藥，此為致敏階段，在首次給藥后14天藥量加倍激發(fā)給藥。同樣觀察動(dòng)物的行為學(xué)變化和血漿中組胺、IgE的含量，綜合判定結(jié)果。結(jié)果表明類過敏反應(yīng)以Beagle犬為最佳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以行為異常及組胺升高為主要判定指標(biāo)，IgE作為輔助指標(biāo)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。食蟹猴在同樣條件下不如上述動(dòng)物敏感。小鼠行為表現(xiàn)更不典型，血液指標(biāo)的檢測(cè)誤差較大，實(shí)驗(yàn)結(jié)果僅

4、供參考。實(shí)驗(yàn)表明吐溫80是誘發(fā)類過敏反應(yīng)的代表性物質(zhì)。羥丙基—β—環(huán)糊精類過敏和過敏反應(yīng)結(jié)果均為陰性。以羥丙基—β—環(huán)糊精為增溶劑的魚腥草注射液新制劑致敏性評(píng)價(jià)結(jié)果為陰性。
　　 3魚腥草注射液新、原制劑比較藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究
　　 抗病毒實(shí)驗(yàn)采用流感病毒FM1和PR8病毒株體內(nèi)感染小鼠肺炎模型，體外CPE法和神經(jīng)氨酸酶熒光測(cè)定法、病毒載量檢測(cè)和小鼠死亡保護(hù)實(shí)驗(yàn)方法，結(jié)果顯示魚腥草注射液新制劑對(duì)流感病毒感染引起的小鼠肺部炎癥

5、均有明顯治療和預(yù)防作用，可改善小鼠肺炎癥狀，降低肺指數(shù)，病毒載量，降低死亡率，延長(zhǎng)小鼠存活時(shí)間；但其抗病毒作用并不是通過直接抑制或殺死病毒，對(duì)神經(jīng)氨酸酶活力也不具有抑制作用。新制劑對(duì)二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹有明顯抑制作用，能降低醋酸導(dǎo)致的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性；同時(shí)，還能降低干酵母致大鼠體溫升高，對(duì)脂多糖導(dǎo)致的家兔體溫升高有明顯的抑制作用。魚腥草注射液抗炎、解熱作用可能是通過抑制炎癥因子TNF—α、IL—1β、IL—8和PGE2釋放而發(fā)揮作

6、用。魚腥草注射液新、原制劑抗病毒、抗炎解熱作用相當(dāng)。
　　 4魚腥草注射劑中吐溫80的定性定量測(cè)定方法建立
　　 本研究采用硫氰酸鈷銨顯色法、薄層層析法和碘化鉍鉀法三種方法進(jìn)行吐溫80的定性鑒定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。吐溫80的定量檢測(cè)方法能準(zhǔn)確的檢測(cè)中藥注射劑中吐溫80含量。吐溫80的定性定量方法的建立在實(shí)驗(yàn)室條件下可以隨機(jī)抽取不同廠家、不同批次樣品進(jìn)行吐溫80定性定量測(cè)定。
　　 本研究主要結(jié)論如下：
　　

7、1中藥注射劑誘發(fā)過敏和類過敏反應(yīng)的異同比較：中藥注射劑導(dǎo)致臨床嚴(yán)重不良反應(yīng)70％以上為類過敏反應(yīng)，與IgE介導(dǎo)的經(jīng)典抗原抗體反應(yīng)不同。主要特征為：首次注射藥物即可出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)及過敏性休克，與過敏反應(yīng)癥候群相似。屬于非抗原抗體反應(yīng)，IgE、IgG未見明顯規(guī)律性變化，但體內(nèi)組胺明顯升高。其致敏物質(zhì)為抗原或半抗原物質(zhì)及某些可以為誘發(fā)組胺釋放的多種物質(zhì)。存在明顯的量效關(guān)系，大劑量、高濃度可誘發(fā)嚴(yán)重不良反應(yīng)。多種注射劑聯(lián)合應(yīng)用可提高發(fā)生率及嚴(yán)

8、重性。類過敏反應(yīng)以Beagle犬為最佳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以行為異常及組胺升高為主要判定指標(biāo)，IgE作為輔助指標(biāo)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。因此，推薦采用Beagle犬致敏性評(píng)價(jià)方法作為中藥注射劑出廠前的常規(guī)安全性檢測(cè)方法。
　　 2魚腥草注射劑中主要致敏物質(zhì)為增溶劑吐溫80，魚腥草雙蒸餾液無明顯的毒副作用。中藥注射劑引發(fā)不良反應(yīng)的致敏原除了考慮藥物本身因素，還有制劑外加輔料和制備、儲(chǔ)存過程中內(nèi)、外源性污染物，這為尋找和解決中藥注射劑不良反應(yīng)誘發(fā)因素

9、提供了思路和方法。
　　 3吐溫80國(guó)內(nèi)外應(yīng)用廣泛。中藥注射劑134品種中吐溫80添加情況很不確定。如果這些品種全部換掉將事關(guān)幾十個(gè)注射劑產(chǎn)品，數(shù)百家生產(chǎn)企業(yè)及幾十萬產(chǎn)業(yè)工人的生存，對(duì)社會(huì)穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)影響是必須慎重考慮的問題。通過我們研究發(fā)現(xiàn)吐溫80引起的類過敏反應(yīng)存在著明顯的量效關(guān)系。因此，優(yōu)選最佳質(zhì)量、最適用量和濃度的吐溫80，既能保證助溶效果，又能最大限度的提高制劑安全性和制劑穩(wěn)定性。
　　 4羥丙基—β—環(huán)糊精助溶

10、效果好、穩(wěn)定，無明顯毒性、致敏性及溶血性，是目前比較理想的增溶劑。以羥丙基—β—環(huán)糊精替換掉吐溫80的魚腥草注射液新制劑，其溶解性、安全性和藥效不受影響，為其恢復(fù)生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了科研依據(jù)。
　　 5誘發(fā)魚腥草注射劑臨床嚴(yán)重不良反應(yīng)因素除了藥物自身因素，制劑工藝中加入吐溫80以及臨床不合理用藥外，還存在很多偶發(fā)因素。因此，本研究只解決了中藥注射劑安全性事件中的一個(gè)因素，而不是唯一因素，還需要深入開展多方面研究，為中藥注射劑進(jìn)行

11、全面再評(píng)價(jià)和再研究提供思路和方法。
　　 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)如下：
　　 1比較中藥注射劑導(dǎo)致類過敏和過敏反應(yīng)的異同，主要從臨床反應(yīng)、病機(jī)、誘發(fā)物質(zhì)、給藥次數(shù)、劑量、檢測(cè)指標(biāo)、非臨床評(píng)價(jià)方法和配伍禁忌進(jìn)行了概括和總結(jié)；
　　 2采用不同種屬動(dòng)物進(jìn)行類過敏實(shí)驗(yàn)研究，優(yōu)選實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、檢測(cè)指標(biāo)，優(yōu)化致敏性評(píng)價(jià)方法，建立中藥注射劑類過敏反應(yīng)的評(píng)價(jià)方法和指標(biāo)；
　　 3通過一系列藥學(xué)、安全性和比較藥理學(xué)研究，證實(shí)以羥丙基