體外誘導(dǎo)大鼠基質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞的基因表達(dá)譜研究.pdf

1、目的:以形態(tài)學(xué)、免疫組化、原位雜交和RT-PCR等技術(shù)確定的不同誘導(dǎo)劑或誘導(dǎo)劑組合誘導(dǎo)MSCs向成軟骨等方向分化的結(jié)果為條件,對(duì)不同誘導(dǎo)劑或誘導(dǎo)劑組合、不同培養(yǎng)和傳代時(shí)間MSCs向軟骨細(xì)胞系分化過程中的基因表達(dá)譜進(jìn)行測(cè)定,以未加任何誘導(dǎo)劑的MSCs傳代培養(yǎng)組作為對(duì)照,對(duì)各組基因表達(dá)進(jìn)行差異分析、比較,探討誘導(dǎo)MSCs向成軟骨分化的最佳條件及MSCs向成軟骨分化的分子機(jī)制,以期發(fā)現(xiàn)促進(jìn)、抑制或一過性基因表達(dá)在誘導(dǎo)MSCs向成軟骨分化中的作

2、用.結(jié)論:應(yīng)用免疫組化、原位雜交和RT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明單獨(dú)應(yīng)用DEX不具備誘導(dǎo)MSCs向軟骨細(xì)胞系分化的能力.TGF-β<,1>表達(dá)Ⅱ型膠原的能力較強(qiáng),但增殖力較DEX組要弱,表明了TGF-β<,1>在誘導(dǎo)MSCs向軟骨細(xì)胞系分化的方向性.TGF-β<,1>和DEX聯(lián)合誘導(dǎo)Ⅱ型膠原的表達(dá)最高且保持了良好的增殖能力.提示MSCs的增殖和分化并不是兩個(gè)獨(dú)立的過程,兩著之間存在著相互影響.應(yīng)用基因表達(dá)譜的研究結(jié)果表明,TGF-β<,1>和

3、DEX聯(lián)合誘導(dǎo)只有前膠原Ⅱα1和聚合素的高表達(dá)而沒有軟骨細(xì)胞前膠原Ⅱβ、膠原Ⅸα1、膠原Ⅺα2的表達(dá),也沒有Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原和Ⅹ型膠原的表達(dá),提示大鼠基質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞生活費(fèi)分化過程中,首先分化為軟骨細(xì)胞的祖細(xì)胞或前體細(xì)胞.單獨(dú)應(yīng)用TGF-β或TGF-β和DEX共同處理大鼠基質(zhì)細(xì)胞能使這些干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞系分化.應(yīng)用TGF-β和適當(dāng)劑量的地塞米松處理大鼠基質(zhì)干細(xì)胞,比單獨(dú)應(yīng)用TGF-β更有利于使大鼠基質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化.單獨(dú)應(yīng)用