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文檔簡介
1、目的:探討丙戊酸鈉(sodium valproate,VPA)對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞(human lens epithelial cells,HLECs)增生和細胞周期的影響。
方法:采用不同濃度的VPA(0.5mmol·L-1、1 mmol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)作用于人晶狀體上皮細胞,四甲基偶氮唑藍法(MTT)檢測在不同時間點(24h、48h、72h)VPA對細胞增生的抑制作用;流式細
2、胞儀測定VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后細胞周期分布情況;Western-blot測定在VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后,P21(細胞周期依賴性激酶抑制因子)在蛋白質水平表達量的改變。
結果:MTT檢測顯示VPA對體外人晶狀體上皮細胞的增生的抑制作用呈時間和劑量依賴性。VPA作用48h后,各藥物濃度組(0.5mmol·L-1、1 m
3、mol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)細胞生長抑制率分別為11.05[%],21.58[%],26.67%和 38.25[%],流式細胞儀檢測顯示VPA可阻滯HLECs由G0/G1期向S期轉換,使G0/G1期細胞增多,S期細胞減少。經(jīng)2 mmol·L-1VPA作用48h,G0/G1期及S期細胞比例分別為85.40±3.90%和 7.35.±1.47[%],較陰性對照組(53.14±1.71%和 35.31±1.14[
4、%])差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Western blot檢測發(fā)現(xiàn)VPA可促進P21蛋白質水平的表達。VPA處理48h后,各組平均灰度比值分別為0.582±0.082(1 mmol·L-1)和0.914±0.113(2 mmol·L-1),與陰性對照組(0.303±0.029)比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05).
結論:VPA可以通過促進P21表達,使人晶狀體上皮細胞阻滯于G0/G1期,最終抑制人晶狀體上皮細胞
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