實時熒光定量PCR法檢測人骨肉瘤MG63細(xì)胞系中β-catenin基因的表達(dá).pdf

1、目的:研究β-catenin基因在人骨肉瘤MG63細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)變化。
　　 方法:培養(yǎng)MG63細(xì)胞株,用不同濃度的wnt3a蛋白或者不同時間段用相同濃度的wnt3a刺激MG63細(xì)胞,用實時熒光定量PCR技術(shù)在mRNA水平檢測β-catenin在MG63細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)變化。培養(yǎng)MG63細(xì)胞株,用相同濃度的wnt3a蛋白刺激,分別在不同的天數(shù)計細(xì)胞個數(shù),比較刺激組與空白組的細(xì)胞數(shù)目的差別。
　　 結(jié)果:不同濃度的wnt3a蛋白

2、(0ng/ml,50ng/ml,100ng/ml,150ng/ml,200ng/ml)刺激MG63細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)β-catenin表達(dá)有變化;濃度為100ng/ml時,細(xì)胞內(nèi)β-catenin表達(dá)水平最高。用100ng/ml的wnt3a刺激細(xì)胞不同的時間段0min,30min,1h,3h,6h,12h,24h結(jié)果分析beta-catenin表達(dá)量最高的時間段為6h。比較空白組與刺激組細(xì)胞增殖的區(qū)別,刺激組細(xì)胞增殖程度明顯高于空白組。