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1、目的:研究補(bǔ)骨脂素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63的增殖和凋亡的影響,并探討其可能發(fā)生的機(jī)制。方法:分別以1280μmol/l ,640μmol/l,320μmol/l,160μmol/l,80μmol/l的補(bǔ)骨脂素與人骨肉瘤細(xì)胞MG-63共同培養(yǎng)24h,48h,72h,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)變化;采用MTT法檢測(cè)補(bǔ)骨脂素對(duì)細(xì)胞MG-63增殖的影響;Hoechst33258細(xì)胞熒光染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)變化;流式細(xì)胞儀分析640μm
2、ol/l~160μmol/l濃度加藥組及對(duì)照組72h后MG-63細(xì)胞凋亡發(fā)生率;Western-Bloting檢測(cè)survivin表達(dá)變化情況。結(jié)果:不同濃度的補(bǔ)骨脂素隨時(shí)間增加作用于MG-63細(xì)胞后,倒置相差顯微鏡下見死細(xì)胞逐漸增多,活細(xì)胞逐漸變少,細(xì)胞分布稀疏,細(xì)胞內(nèi)碎片增多;MTT法檢測(cè)補(bǔ)骨脂素在72h抑制人骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的抑制率分別為(84.07±3.7)%、(77.74±3.3)%、(71.05±3.5)%、(61.
3、15±4.3)%、(49.03±3.2)%;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡百分率分別為(17.8±0.6)%、(22.2±1.3)%、(30.3±2.8)%;晚期凋亡百分率分別為(30.4±3.1)%、(14.1±1.2)%、(8.6±0.4)%;Western-Bloting檢測(cè)到survivin表達(dá)明顯下調(diào)。結(jié)論:補(bǔ)骨脂素在體外能顯著抑制人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,這種機(jī)制可能依賴于下調(diào)MG-63細(xì)胞survivin基因的
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