WIF-1對人骨肉瘤MG-63細(xì)胞中β-catenin表達(dá)的作用研究.pdf

1、目的:WIF-1是Wnt信號通路中最常見抑制因子之一，本實驗研究WIF-1對人骨肉瘤MG-63細(xì)胞Wnt信號通路中β-catenin表達(dá)量的影響。
　　方法:細(xì)胞培養(yǎng)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞，0ng/ml濃度的WIF-1作為空白對照組，分別以0ng/ml、48 ng/ml、60 ng/ml、80 ng/ml、120 ng/ml濃度的WIF-1刺激MG-63細(xì)胞，分別用FQ-PCR及Western-Blot法從基因水平、蛋白水平測定細(xì)

2、胞β-catenin的表達(dá)量;細(xì)胞培養(yǎng)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞，用WIF-1刺激細(xì)胞，分別在第0、12、24、48、72、96h對各組細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，觀察空白組及WIF-1刺激組細(xì)胞數(shù)目的變化情況。
　　結(jié)果:不同濃度(0ng/ml、48 ng/ml、60 ng/ml、80 ng/ml、120 ng/ml)WIF-1刺激下，F(xiàn)Q-PCR法顯示β-catenin mRNA的相對表達(dá)總量2-⊿⊿CT分別為1、0.55±0.30、0.44±

3、0.24、0.35±0.15、0.24±0.21。與空白組相比較，WIF-1刺激下β-cateninmRNA表達(dá)量均降低(F=6.02，P＜0.05)。隨著WIF-1濃度的增加，β-catenin mRNA表達(dá)量下降，但組間的抑制作用無明顯差別(P＞0.05); Western-Blot法顯示β-catenin/β-actin蛋白相對表達(dá)量分別為1.4±0.11、0.86±0.10、0.51±0.11、0.45±0.06、0.18±0.