干擾素刺激基因15在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)及意義的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：檢測干擾素刺激基因15(interferon-stimulated gene15，ISG15)在肝癌組織及在肝細(xì)胞系中的表達(dá)情況，分析探討ISG15表達(dá)與肝癌病理特征及生物學(xué)行為的相關(guān)性。
　　 方法：收集50例手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的肝癌組織及相應(yīng)的癌旁組織；培養(yǎng)正常胎肝細(xì)胞LO2、人肝癌細(xì)胞系HepG2及高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞系MHCC97-H、低轉(zhuǎn)移細(xì)胞系MHCC97-L。采用免疫組織(細(xì)胞)化學(xué)染色技術(shù)檢測ISG15在肝癌組織

2、及肝細(xì)胞系中的相對表達(dá)水平及定位。Westemblotting方法檢測ISG15在肝癌組織、癌旁組織和肝細(xì)胞系中的蛋白表達(dá)水平。熒光定量PCR方法檢測ISG15在肝癌組織、癌旁組織及不同肝細(xì)胞系中的mRNA表達(dá)水平。分析ISG15表達(dá)與肝癌的病理特征及生物學(xué)行為的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：免疫組織(細(xì)胞)化學(xué)染色顯示，ISG15在肝癌細(xì)胞的細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中均有表達(dá)；ISG15在肝癌腫瘤組織中的表達(dá)高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=

3、-4.4，P=0.011)；在MHCC97-H中的表達(dá)明顯高于MHCC97-L(t=3.5，P=0.037)，同樣，在HepG2中的表達(dá)高于LO2(t=4.1；P=0.019)。Westem blotting結(jié)果顯示，ISG15蛋白表達(dá)在肝癌腫瘤組織中明顯高于癌旁組織，差異有顯著(t=-3.4，P=0.028)；結(jié)合相應(yīng)臨床資料分析顯示，ISG15的蛋白表達(dá)水平與年齡、性別、腫瘤大小、乙肝DNA是否陽性無明顯相關(guān)性(P分別為0.36、0

4、.85、0.57、0.35)，而與腫瘤分化程度及侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)(P分別為0.012、0.043)；ISG15表達(dá)在HepG2中顯著高于LO2(t=-4.51，P=0.011)，同樣，在MHCC97-H中的表達(dá)顯著高于MHCC97-L(t=5.90，P=0.004)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在基因水平上，ISG15在肝癌腫瘤組織中的表達(dá)較癌旁組織中低(t=-2.324，P=0.027)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在MHCC97-H中的表達(dá)明顯低于MHCC