CTLA4Ig局部轉(zhuǎn)基因治療大鼠小腸移植急性排斥實驗研究.pdf

1、一、大鼠同種異體在體異位節(jié)段小腸移植模型的建立.目的:為研究抗小腸移植排斥治療提供良好的動物實驗?zāi)Ｐ?方法:選用大鼠進行同種異體異位節(jié)段性小腸移植.重建供腸血管采用腹主動脈-腎下腹主動脈吻合以及門靜脈-腎下下腔靜脈吻合.結(jié)論:該模型制作成功率較高、適合小腸移植排斥研究.二、大鼠移植腸局部CTLA4Ig基因轉(zhuǎn)染的可行性研究.目的:探討CTLA4Ig基因能否在移植小腸局部轉(zhuǎn)染表達.方法:移植前經(jīng)腸系膜上動脈給供腸灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4I

2、g cDNA重組質(zhì)粒,應(yīng)用免疫組織學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)觀察移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達.結(jié)論:經(jīng)腸系膜上動脈體外灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)?？捎行мD(zhuǎn)染移植小腸.三、CTLA4Ig局部轉(zhuǎn)基因?qū)π∧c移植急性排斥的治療作用.目的:研究CTLA4Ig基因在移植小腸局部表達及其表達產(chǎn)物對急性排斥反應(yīng)的治療作用.方法:建立SD→Wistar的大鼠異位小腸移植模型,并隨機分為實驗組(CTLA4Ig轉(zhuǎn)基

3、因組)和對照組(非轉(zhuǎn)基因組).實驗組供腸移植前經(jīng)腸系膜上動脈注入脂質(zhì)體包襄的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)粒,術(shù)后應(yīng)用免疫組織學(xué)檢查移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達.移植術(shù)后3,7,10d分別獲取各組的移植小腸進行組織學(xué)檢查及細胞凋亡測定.結(jié)論:CTLA4Ig基因可在移植小腸局部轉(zhuǎn)染表達,其表達產(chǎn)物可防止移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的發(fā)生.四、移植腸局部CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因?qū)κ荏w免疫排斥反應(yīng)的影響.目的:研究CTLA4Ig基因在小腸局部

4、轉(zhuǎn)染表達及其表達產(chǎn)物對受體免疫排斥反應(yīng)的影響.方法:移植前經(jīng)腸系膜上動脈給供腸灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA重組質(zhì)粒,應(yīng)用免疫組織學(xué)及逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)檢測移植小腸中CTLA4Ig轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的表達,并觀察受體對供腸及供者同系鼠皮膚移植的排斥反應(yīng).結(jié)論:經(jīng)腸系膜上動脈體外灌注脂質(zhì)體包裹的CTLA4Ig cDNA可有效轉(zhuǎn)染移植小腸,并誘導(dǎo)受體對移植小腸的免疫耐受,但移植腸局部CTLA4Ig基因轉(zhuǎn)染不能誘導(dǎo)出供者特異的外周耐受狀態(tài).