SE后GDNF、GDNFRα和Ret在大鼠頂葉皮質和海馬的表達.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文SE后GDNF、GDNFRα和Ret在大鼠頂葉皮質和海馬的表達姓名：王軍申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：高旭光2000.4.1時 組、 S E 后8 小時 組、 S E 后 1 天組、 S E 后3 天組、 S E 后5 天 組、 S E后 7 天組。動物模型 采用鏗一 匹羅卡品 大鼠S E 模型。 腹腔注射抓化 鏗3 m E q / k g ， 在注射后 1 6 一 1 8 小時予以匹羅卡品4 0

2、m g / k g 腹腔注射， 并同 時予以 澳甲 基阿 托品1 0 m g / k g 腹腔注射以 減少匹羅卡品的中 樞外的 副作用。 在給予匹 羅卡品 后 巧- 3 0 分鐘， 大鼠出 現(xiàn)痛 性發(fā)作， 最終發(fā)展成 S E 。如在給予匹羅卡品后 1 小時仍未出現(xiàn) S E ， 可重復給 予匹 羅卡品。 痛性發(fā) 作的 結果按 R a c i n e 分級進行判定， 出 現(xiàn)連續(xù)的N 級以 上的 痛性發(fā)作為成功。各 組實 驗 動 物 在 各時

3、間 點， 經(jīng)1 0 %水合氯醛深 麻醉( 8 0 0 m g / k g ) 后， 以 l 0 0 m l 肝素化升生理鹽水和4 9 C 4 %多聚甲 醛2 5 0 m 1 進行灌注固定。開顱取全腦置相同固定液中 后固定。自 額極6 m m處切取一塊2 m m厚冠狀腦片放于4 9 C 3 0 %蔗糖溶液中浸泡2 4 小時 后， 人恒冷切片 機( 一 2 4 ` C ) 切成6 1 i m厚的切片， 貼附于鉻明 礬 明 膠處 理過的

4、載玻片上， 一 7 0 ℃冰 箱保存。免疫組織化學染色采用S P 法。統(tǒng) 計 學 處 理: 皮 質 區(qū) ‘ 丙 側 和 歹 卜 側 幣 央 前 吮 下 區(qū) ) : 在4 0 、 1 0 倍 光 鏡 下 用 物 鏡 測 微 尺 分 別 計 數(shù)2 0 0 p , m x 2 0 0 } t m 視 野內 各 組的G D - N F , G D N F R a 和R e t 陽 性細胞數(shù)， 每只大鼠 取兩張切片， 每張切片 計數(shù)3 個視野

5、。海馬 C A 3區(qū): 在2 0 x 1 0 倍光鏡視野下用物鏡測微尺 計數(shù) 1 毫米長度的海馬的G D N F , G D N F R a 和R e t 陽 性細胞 數(shù)， 每只鼠 計數(shù)2 張 切片。 并計數(shù)S E 后3 天組海馬C A 3 區(qū) 和門 區(qū)G D N F 陽 性細 胞和 壞死神經(jīng) 元的 百 分率。 實驗數(shù) 據(jù)以 均數(shù)士 標 準差表 示， 進行方 差齊 性檢驗， 如 方差齊， 使用t 檢驗， 否則用秩和檢 驗。 C A 3