SDF-1a-CXCR4在發(fā)育大鼠海馬和低氧缺糖海馬腦片中的表達(dá).pdf

1、目的：目前，SDF-1α/CXCR4生物軸在多種生物學(xué)效應(yīng)中的重要作用備受矚目。SDF-1α作為一種化學(xué)趨化劑和信號(hào)，可通過與其受體CXCR4結(jié)合發(fā)揮調(diào)節(jié)胚胎神經(jīng)元發(fā)育的作用。SDF-1α/CXCR4信號(hào)通路對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和在缺血性腦損傷后干細(xì)胞“歸巢”起重要的作用，為更好的了解SDF-1α/CXCR4在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及缺血性腦損傷中的作用，我們研究了發(fā)育大鼠海馬及海馬腦片低氧缺糖培養(yǎng)后神經(jīng)元SDF-1α/CXCR4的表達(dá)分布情

2、況。
　　 方法：根據(jù)鼠齡將清潔級(jí)SD大鼠分為9組，即生后4天組，1、2、3、4、5、6、7周組和3月齡組，每組9只，雌雄不拘，同等條件喂養(yǎng)。用免疫組化染色觀察海馬各區(qū)的神經(jīng)元SDF-1α和CXCR4表達(dá)的空間分布情況：并用免疫印跡方法檢測(cè)大鼠不同發(fā)育階段SDF-1α和CXCR4在海馬CA區(qū)和DG區(qū)的表達(dá)規(guī)律。取新生6-9天SD大鼠36只，雌雄不拘，運(yùn)用海馬腦片培養(yǎng)技術(shù)隨機(jī)分為正常對(duì)照組和低氧缺糖組(OGD)兩組，利用PI熒光顯

3、色來觀察海馬腦片各區(qū)損傷情況，尼氏染色觀察神經(jīng)元形態(tài)，免疫組織化學(xué)染色觀察SDF-1α和CXCR4在海馬腦片神經(jīng)元的表達(dá)情況，免疫印跡檢測(cè)OGD前后SDF-1α和CXCR4的變化，從而研究SDF-1α/CXCR4軸與缺血性腦損傷之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：1.SDF-1α和CXCR4在發(fā)育海馬各區(qū)表達(dá)：(1)免疫印跡檢測(cè)顯示，生后各時(shí)間點(diǎn)分別在分子量為11KD、43KD處檢測(cè)到SDF-1α和CXCR4陽性條帶。CXCR4在CA區(qū)和

4、DG區(qū)的相對(duì)表達(dá)量均于生后1周到達(dá)高峰(P＜0.05），隨后隨年齡增長(zhǎng)而逐漸下降；至生后3周，CA區(qū)CXCR4蛋白表達(dá)降至成年水平，而DG區(qū)于生后4周降至成年水平；SDF-1α在海馬CA區(qū)及DG區(qū)的表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)免疫組化結(jié)果顯示：從生后4天至成年，大鼠海馬CA區(qū)和DG區(qū)可見CXCR4蛋白表達(dá)陽性的細(xì)胞，其胞漿呈棕黃色。生后早期，CA區(qū)錐體細(xì)胞伸出的軸丘上有棕黃色顯色，后期其長(zhǎng)軸突及短樹突上也有不同程度CXCR4蛋白表達(dá)；

5、DG區(qū)CXCR4陽性細(xì)胞主要表達(dá)于齒狀回顆粒細(xì)胞下層。SDF-1α陽性細(xì)胞呈棕黃色著色，散在分布于CA區(qū)錐體層細(xì)胞內(nèi)和DG區(qū)顆粒細(xì)胞層內(nèi)。
　　 2．SDF-1α和CXCR4在培養(yǎng)海馬腦片OGD損傷前后的表達(dá)：培養(yǎng)海馬腦片OGD損傷前后均有SDF-1α和CXCR4的蛋白表達(dá)，免疫印跡結(jié)果顯示，SDF-1于OGD后表達(dá)量明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),CXCR4蛋白表達(dá)則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)