熱休克蛋白70對青光眼視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護作用的研究.pdf

1、目的：青光眼是世界第2位的致盲眼病，其致盲過程具有不可逆的特點，目前臨床上采用的主要治療方法是用藥物或者手術(shù)方法降低眼內(nèi)壓以減輕視功能損害。而有相當(dāng)一部分患者雖然眼內(nèi)壓得到了有效的控制，視功能損害仍不斷進展。目前很多研究者正在試圖尋找能阻斷或延緩視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion eells，RGCs)原發(fā)性和(或)繼發(fā)性損傷的方法，這一治療策略稱為青光眼視神經(jīng)保護治療。視神經(jīng)保護治療為目前青光眼治療的研究熱點。熱休克蛋

2、白(heat shock protein，HSP)是所在原核細(xì)胞和真核細(xì)胞遭受高溫或其他應(yīng)激所產(chǎn)生的一組在結(jié)構(gòu)上高度保守的蛋白質(zhì)家族，它們在生物體的生長、發(fā)育及進化過程中，在維持機體的生理狀態(tài)以及某些疾病的病理生理過程中均發(fā)揮重要作用。而在所有HSP中，HSP70在神經(jīng)保護方面發(fā)揮著重要的作用<'[1]>。本實驗采取電凝3組鞏膜表面靜脈及角膜緣血管的方法誘導(dǎo)形成大白鼠慢性高眼壓模型，觀察熱休克蛋白70(HSP70)對慢性高眼壓條件下RG

3、Cs損傷的保護作用。 方法：將60只Sprague-Dawlye(SD)大白鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機分為三組：空白對照組(A組)，高眼壓組(B組)及熱休克處理組(C組)。B組以10﹪水合氯醛3mg/Kg腹腔注射麻醉后，采用電凝鞏膜表面3組靜脈及角膜緣周圍血管，減少房水靜脈回流的方法升高眼壓，形成慢性高眼壓模型；C組以10﹪水合氯醛腹腔注射麻醉后，置于45℃恒溫水浴箱中水浴15min，常溫下放置6h后用同樣的方法制作慢性高眼壓模

4、型，此后隔日水浴一次；A組進行假手術(shù)處理(僅剪丌球結(jié)膜，而不電凝鞏膜表面靜脈及角膜緣血管)。隔日觀察3組大白鼠眼壓，4周后將各組大白鼠處死，使用透射電鏡觀察其RGCs調(diào)亡情況，同時用免疫組化方法觀察視網(wǎng)膜中HSP70陽性細(xì)胞的表達及分布情況。結(jié)果： (1)眼壓：術(shù)前3組眼壓差異無顯著性，術(shù)后即刻B組及C組眼壓平均值分別為52.46±1.74mmHg及51.89±2.15mmHg，術(shù)后1周B、C兩組眼壓基本穩(wěn)定于30mmHg左右。

5、B、C兩組眼壓值與A組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，B、C兩組之間眼壓差異無顯著性。 (2)光鏡：運用HE染色法觀察發(fā)現(xiàn)，第4周末B組大白鼠視網(wǎng)膜各層組織明顯變薄，視神經(jīng)凹陷加深，而C組變化不明顯。 (3)電鏡：B組大白鼠4周后RGCs出現(xiàn)調(diào)亡現(xiàn)象，而C組在實驗結(jié)束時尚未發(fā)現(xiàn)明顯細(xì)胞調(diào)亡。 (4)免疫組化：采用免疫組化技術(shù)檢測各組大白鼠視網(wǎng)膜上HSP70的表達情況顯示，C組HSP70表達明顯高于A組及B組，差