激活的CIK細胞基因表達譜研究.pdf

1、目的：觀察負載抗原的DC細胞對CIK殺傷活性的作用及DC細胞誘導(dǎo)的CIK基因表達譜的變化。 方法：以人PBMC制備DC細胞和CIK細胞。DC細胞的制備方法是將貼壁細胞混懸于10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)液(含IL-4和GM-CSF)，于37℃5％CO2孵育箱中培養(yǎng)7天。CIK細胞是將非貼壁細胞混懸于10％FBS RPMI 1640(含INF-γ)，培養(yǎng)24小時后，補加IL-2、IL-1a、鼠抗人CD3單抗，繼續(xù)培養(yǎng)7或14

2、天。用流式細胞術(shù)分析DC細胞和CIK細胞的表型。以混合淋巴細胞反應(yīng)測定DC細胞活性，以體外細胞毒性實驗測定DC激活的CIK細胞的殺傷活性。利用基因芯片技術(shù)檢測它們在釋放相關(guān)細胞因子水平及信號傳導(dǎo)通路所發(fā)生的一系列變化。 結(jié)果：表型分析顯示本實驗制備的CIK細胞中主要是CD3<'+>CD56<'+>NKT細胞，增殖能力較強；DC細胞表達高水平的CD40、CD80、CD86和HLA-DR，可誘導(dǎo)混合淋巴反應(yīng)。未負載抗原的DC細胞和抗

3、原負載的DC細胞均可刺激CIK細胞的增殖，二者之間無顯著性差別。但未負載抗原的DC細胞不能顯著地進一步增強CIK細胞的殺傷活性?？乖撦d的DC細胞能顯著增強CIK細胞特異性殺傷靶細胞的能力。芯片掃描發(fā)現(xiàn)：50種信號傳導(dǎo)因子發(fā)生5倍以上的改變。 結(jié)論：抗原負載的DC細胞可活化CIK細胞，并使其具有特異性殺傷腫瘤細胞的能力。DC激活的CIK細胞基因表達譜的變化主要見于Cys-cys、MIP-2a、IFN調(diào)節(jié)因子-1、IFN拮抗性細胞