BMP-2、TGF-β3雙基因修飾質(zhì)粒在骨髓間充質(zhì)干細胞內(nèi)的表達及對增殖活性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本實驗旨在通過陽離子脂質(zhì)體包埋BMP-2、TGF-β3雙基因修飾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞,觀察BMP2及TGFβ3在細胞內(nèi)表達及對細胞增殖活性的影響,為下一步研究雙基因表達載體對間充質(zhì)干細胞成骨分化影響奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:全貼壁法培養(yǎng)兔骨髓間充質(zhì)干細胞,進行原代和傳代培養(yǎng),取P2代細胞進行轉(zhuǎn)染,分別將plRES/BMP-2、pIRES/TGFβ3、pIRES/BMP2-TGFβ3及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入干細胞,并設(shè)置空白對照組,

2、轉(zhuǎn)染兩天后RT-PCR檢測各組BMP2及TGFβ3的表達情況,繪制細胞生長曲線,計算細胞倍增時間,比較各組干細胞的增殖情況。
　　 結(jié)果:pIRES/BMP2-TGFβ3轉(zhuǎn)染組BMP2及TGFp3mRNA含量高于單基因組及空白對照組(p＜0.05),雙基因均可獲得穩(wěn)定表達;雙基因組細胞倍增時間較單一組及空白對照組明顯縮短(p＜0.05),雙基因組具有良好的促進BMCs增殖作用。
　　 結(jié)論:雙基因修飾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染干細胞可以再

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